シナプス可塑性の生後発達におけるNMDA受容体機能調節の役割

NMDA 受体功能调节在出生后突触可塑性发育中的作用

基本信息

批准号：
15029236
负责人：
真鍋俊也
金额：
$ 13.63万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1.NMDA受容体のNR2Bサブユニットの最も強くリン酸化されるチロシン残基であるTyr1472をフェニルアラニンに置換したNR2Bサブユニットを発現するノックインマウスを作製し、その機能解析を行った。このノックインマウスでは、扁桃体の外側核での興奮性シナプス伝達の長期増強(LTP)が障害され、音刺激による恐怖条件付けに異常が観察された。免疫電顕によりNR2Bサブユニットのシナプス後部における局在を検討したところ、シナプス後肥厚の外側に分布する傾向を示した。さらに、NR2Bサブユニットのエンドサイトーシスに異常があることもわかり、NR2BサブユニットのTyr1472のリン酸化がNMDA受容体のシナプスにおける局在を制御し、シナプス可塑性と恐怖学習に重要な役割を果たすことが明らかとなった。2.チロシン脱リン酸化酵素であるPtprzを欠損するマウスにおいて、海馬スライスCA1領域における興奮性シナプス伝達のLTPが、若齢マウスでは正常だが、成体マウスにおいては有意に増大していることを見出した。NMDA受容体シナプス応答には異常がみられず、ROCK経路の阻害によりこの増大が選択的に消失したことから、NMDA受容体活性化以降の過程に異常があることが示唆された。さらに、場所記憶能力の異常が成体マウスのみでみられたことから、これらの異常は年齢依存的に出現することも明らかとなった。3.マウスにおける唾液分泌の副交感神経系による調節に、3型ムスカリン性アセチルコリン受容体(M_3R)が重要な役割を果たすことを、この受容体を欠損するマウスの唾液腺細胞におけるカルシウム測光により明らかにした。コリン作動薬投与によりみられる唾液腺細胞でのカルシウム濃度上昇が、M_3R欠損マウスでほとんど消失し、M_1R、M_3Rダブル欠損マウスでは、高濃度の作動薬投与でも完全に消失していた。

1.表达NR2B亚基的敲入小鼠Tyr1472是NMDA受体NR2B亚基的最强磷酸化的酪氨酸残基，并进行了功能分析。在这种敲击小鼠中，杏仁核外侧核中兴奋性突触传播的长期增强受到损害，并且观察到由于声音刺激引起的恐惧条件异常。当通过免疫电子显微镜检查NR2B亚基在后突触区域的定位时，它显示出在突触后增厚外分布的趋势。此外，发现NR2B亚基的内吞作用异常，表明NR2B亚基中Tyr1472的磷酸化调节NMDA受体的突触定位，并在突触可塑性和恐惧学习中起重要作用。 2。我们发现，在缺乏酪氨酸去磷酸化酶PTPRZ的小鼠中，年轻小鼠的兴奋性突触传播的LTP正常是正常的，但在成年小鼠中显着增加。 NMDA受体突触反应没有异常，并且由于抑制岩石途径而选择性消除了增加，这表明NMDA受体激活后的过程异常。此外，仅在成年小鼠中观察到异常记忆能力，表明这些异常以年龄依赖性方式出现。 3。缺乏唾液腺细胞的小鼠唾液腺细胞的钙光度法证明，3型毒蕈碱乙酰胆碱受体（M_3R）在副交感神经系统通过唾液分泌中起着重要作用。在M_3R缺陷型小鼠中，通过胆碱能药物给药观察到的唾液腺细胞中钙浓度的增加几乎被完全消除，即使具有高浓度的激动剂给药，M_1R和M_1R和M_3R双重缺陷小鼠也几乎被完全消除。