転写抑制因子(BCL6遺伝子群とポリコーム遺伝子群)による造血制御

转录抑制因子（BCL6 基因组和 Polycomb 基因组）对造血的调节

• 批准号: 11162206
• 负责人: 岡田 誠治
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11162206/
• 关键词: BCL6; BAZF; トランスジェニックマウス; IL-5; アポトーシス

BCL6とそのホモログであるBAZFの機能解析を行なった。1)造血幹細胞におけるBCL6とBAZFの発現: BCL6とBAZFは、共にマウス造血幹細胞に発現していた。BCL6とBAZFのノックアウトマウスを用いて機能解析を行う予定である。2)BCL6強制発現による細胞死誘導機序の解析: BCL6を強制発現させると繊維芽細胞株NIH3T3がアポトーシスに陥った。アポトーシスにはPOZドメインとBAZFと共通の17a.a.の2カ所が重要な役割を果たしていた。エストロジェンレセプターとのキメラ遺伝子を用いた検討から、BCL6は17a.a.を介してアポトーシスを誘導していることが示唆された。また、Histone deacethylase(HDAC)阻害剤であるTSA(Trichostatin A)添加によりアポトーシスが阻害されることから、BCL6が17a.a.によるHDAC複合体の染色体DNAへのリクルートを介して細胞死を誘導している事を明らかにした。3)BCL6トランスジェニックマウスの作製: BCL6をIg遺伝子のプロモーターに組み換えて、トランスジェニックマウス(Ig-BCL6マウス)を作製した。Ig-BCL6マウスではT細胞依存性抗原(DNP-OVA)投与による抗体産生能が亢進していた。またlck-BCL6のトランスジェニックマウスも作製しており、このマウスとBCL6ノックアウトマウスの解析からBCL6により、IL-5の産生が制御されていることがわかった。プロモーター解析により、IL-5のプロモーターにあるBCL6結合部位を介してBCL6が直接IL-5の発現を制御していることが判明した。4)BAZFノックアウトマウスの作製: BAZFのノックアウトマウスを作成中であり、現在キメラマウスが生まれている。

我们对 BCL6 及其同源物 BAZF 进行了功能分析。 1)BCL6和BAZF在造血干细胞中的表达：BCL6和BAZF在小鼠造血干细胞中均表达。我们计划使用 BCL6 和 BAZF 敲除小鼠进行功能分析。 2)强制表达BCL6诱导细胞死亡的机制分析：当强制表达BCL6时，成纤维细胞系NIH3T3发生凋亡。 POZ 结构域和 BAZF 共有的两个位点在细胞凋亡中发挥重要作用。使用与雌激素受体嵌合的基因进行的研究表明，BCL6 通过 17a.a 诱导细胞凋亡。此外，组蛋白脱乙酰酶 (HDAC) 抑制剂 TSA（曲古抑菌素 A）的添加可抑制细胞凋亡，表明 BCL6 通过 17a.a 将 HDAC 复合物募集到染色体 DNA 来诱导细胞死亡。 3)BCL6转基因小鼠的制作：将BCL6与Ig基因启动子重组，制作转基因小鼠(Ig-BCL6小鼠)。在 Ig-BCL6 小鼠中，通过给予 T 细胞依赖性抗原 (DNP-OVA) 增强抗体产生。我们还生成了 lck-BCL6 转基因小鼠，对这些小鼠和 BCL6 敲除小鼠的分析表明，BCL6 控制 IL-5 的产生。启动子分析表明，BCL6 通过 IL-5 启动子中的 BCL6 结合位点直接控制 IL-5 的表达。 4）BAZF基因敲除小鼠的制作：我们目前正在制作BAZF基因敲除小鼠，目前嵌合小鼠正在诞生。

项目成果

Matsumoto I et al.: "Single cell analysis of T cells infiltrating labial salivary glands from patients with Sjogren's syndrome"Int J Mol Med. 4. 519-527 (1999)

Matsumoto I 等人：“干燥综合征患者浸润唇唾液腺的 T 细胞的单细胞分析”Int J Mol Med。

Okada S et al.: "Prolonged expression of c-fos suppresses cell cycle entry of dormant hematopoietic stem cells"Blood. 93. 816-825 (1999)

Okada S 等人：“c-fos 的延长表达抑制休眠造血干细胞的细胞周期进入”血液。

Okada S et al.: "Impairment of B lymphocytopoiesis in precocious aging (klotho) mice"Int Immunol. (in press). (2000)

Okada S 等人：“早熟（klotho）小鼠中 B 淋巴细胞生成的损伤”IntImmunol。