マウス造血幹細胞におけるアポトーシス制御機構の解析

小鼠造血干细胞凋亡调控机制分析

• 批准号: 09770810
• 负责人: 岡田 誠治
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770810/
• 关键词: 造血幹細胞; c-Fos; トアンスジェニックマウス; アポトーシス; ストロマ細胞; 造血微小環境; iNOS; bcl-xL; IFN-γ

造血幹細胞の分化・増殖過程におけるc-Fosの発現とその機能を明らかにするために、発現誘導型c-Fosトランスジェニックマウス(Mx-c-fosマウス)とc-Fos欠損マウスから分離した造血幹細胞分画用いて以下の研究成果を得た。1) FACSにより分離した造血幹細胞分画は、SCF,IL-3,IL-6等のサイト力イン添加により一過性にc-fosを発現した。2) Mx-c-fosマウスから分離した造血幹細胞は、c-Fosを持続発現させるとサイトカイン添加による増殖もストロマ細胞上での増殖が抑制されたが、c-Fosの発現消失後には増殖を開始した。BrdU染色やFACSによる細胞周期解析結果から、c-Fos持続発現によっても造血幹細胞はアポトーシスには陥らず、増殖刺激後も造血幹細胞は静止期(GO期)に留まることが示唆された。3) 造血幹細胞より分化した造血前駆細胞では、c-Fos持続発現による分化・増殖抑制は認められなかった。4) c-Fos欠損マウスの造血幹細胞は、サイトカイン刺激・ストロマ細胞依存性増殖のいずれにも異常は認められなかった。造血幹細胞は定常状態ではそのほとんどが静止期にあり、一部の造血幹細胞のみが造血に関与している。種々の刺激により造血幹細胞に一過性に発現誘導されるc-Fosにより、造血幹細胞が静止期に留まるか増殖を開始するかを決定する因子であることを明らかにした。

为了阐明c-Fos在造血干细胞分化和增殖过程中的表达和功能，从表达诱导的c-Fos转基因小鼠（Mx-c-fos小鼠）和c-Fos缺陷小鼠中分离造血细胞使用干细胞分级分离获得了以下研究结果。 1) 当添加细胞毒性剂如SCF、IL-3和IL-6时，通过FACS分离的造血干细胞组分瞬时表达c-fos。 2)在从Mx-c-fos小鼠分离的造血干细胞中，当c-Fos持续表达时，即使添加细胞因子，基质细胞上的增殖也受到抑制，但在c-Fos表达消失后，增殖开始受到抑制。使用BrdU染色和FACS进行细胞周期分析的结果表明，即使c-Fos持续表达，造血干细胞也不会发生凋亡，并且即使在增殖刺激后，造血干细胞仍保持在稳定期（GO期）。 3)在由造血干细胞分化的造血祖细胞中，由于c-Fos的持续表达，没有观察到分化或增殖的抑制。 4) c-Fos缺陷小鼠的造血干细胞在细胞因子刺激或基质细胞依赖性增殖方面均未观察到异常。大多数造血干细胞处于稳定状态的静止期，只有部分造血干细胞参与造血。我们发现，c-Fos通过各种刺激在造血干细胞中瞬时诱导表达，是决定造血干细胞是否保持稳定期或开始增殖的因素。

项目成果

Okada S.,et al.: "A physiological role of Bcl-xL induced in activated macrophages." J.Immunol.160. 2590-2596 (1998)

Okada S.,et al.：“Bcl-xL 在激活的巨噬细胞中诱导的生理作用。”

Okada,S.: "A Physiological Role of Bcl-xL Induced in Activated Macrophages." J.Jmmunol.(In press). (1998)

Okada,S.：“Bcl-xL 在激活的巨噬细胞中诱导的生理作用。”

Okabe S.,et al.: "BAZF,a novel Bc16 homolog,functions as a transcriptional repressor." Mol.Cell.Biol.18. 4235-4244 (1998)

Okabe S. 等人：“BAZF 是一种新型 Bc16 同源物，具有转录抑制因子的功能。”

Inada K.,et al.: "c-Fos induces apoptosis in germinal center B cells." J.Immunol.161. 3853-3861 (1998)

Inada K.,et al.：“c-Fos 诱导生发中心 B 细胞凋亡。”

Fukuda,T.: "Disruption of the Bcl6 gene results in an impaired germinal center formation." J,Exp.Med.186. 439-448 (1997)

Fukuda,T.：“Bcl6 基因的破坏会导致生发中心形成受损。”