マラリア伝搬阻止ワクチン作用メカニズムの解析に有用な動物実験モデルの作成

创建有助于分析预防疟疾传播疫苗作用机制的动物实验模型

• 批准号: 11147220
• 负责人: 坪井 敬文
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11147220/
• 关键词: マラリア; 伝搬阻止ワクチン; オーキネート; DNAワクチン

[研究の目的]申請者は、免疫機構がよく解明されているマウスを宿主とするネズミマラリア原虫(Plasmodium yoelii)を用いて、ヒトマラリア伝搬阻止ワクチンの動物モデルの作成を試みた。[今年度の成果及び考察]組み換え蛋白を用いた免疫実験:酵母を用いて発現させた組み換えrPys21又はrPys25をフロイントアジュバントを用いてDBA/2マウスに2回免疫し、免疫抗原に対する特異抗体価を確認した後、P.yoelii感染後Anopheles stephensiに吸血させた後オーシスト数を算定し、伝搬阻止効果の指標とした。その結果、rPys21、rPys25いずれの免疫マウスにおいても、有意な伝搬阻止能が確認され、その効果は抗体価が高いほど顕著であった。DNAワクチンを用いた免疫実験:Pys21又はPys25のDNAワクチンを耳介内に3回免疫した。また、他のグループのマウスにはジーンガンを用いて皮内免疫を3回行った。免疫抗原に対する特異抗体価を確認した後、上記の方法で伝搬阻止効果を検討した。その結果、Pys21、Pys25いずれのDNAワクチン免疫マウスにおいても、伝搬阻止能を有する特異抗体が誘導され、その効果は抗体価が高いほど顕著であった。以上の結果より、伝搬阻止ワクチンをいかなる免疫源、免疫方法で投与しても、特異抗体がどの程度誘導されるかが、効果の指標となることが確認された。したがって、現在まで熱帯熱マラリア伝搬阻止ワクチン開発において、効果判定方法として用いられてきたメンブレンフィーディング法は、この種のマラリアワクチンの効果判定法として有用であると考えられた。

[研究目的] 申请人试图利用约氏疟原虫（其免疫系统已被充分了解的小鼠宿主）创建预防人类疟疾传播的疫苗动物模型。 【今年的结果与讨论】 使用重组蛋白的免疫实验：使用弗氏佐剂，用酵母表达的重组rPys21或rPys25免疫DBA/2小鼠两次，确认针对免疫抗原的特异性抗体效价后，测定数量。感染约氏疟原虫并让斯氏按蚊吸血后计算卵囊，以此作为预防繁殖有效性的指标。结果，在rPys21和rPys25免疫小鼠中都证实了显着的增殖阻断能力，并且随着抗体滴度越高，效果越明显。使用DNA疫苗的免疫实验：Pys21或Pys25 DNA疫苗耳内免疫3次。另外，其他组小鼠均采用基因枪皮内免疫3次。确认针对免疫抗原的特异性抗体效价后，使用上述方法检查增殖阻断效果。结果，用Pys21或Pys25 DNA疫苗免疫的小鼠体内诱导出具有抑制增殖能力的特异性抗体，并且抗体滴度越高，效果越明显。从以上结果可以确认，无论使用何种免疫源或免疫方法来施用增殖阻断疫苗，诱导特异性抗体的程度是功效的指标。因此，迄今为止在预防恶性疟疾传播的疫苗开发中用作评价效果的方法的膜饲法被认为作为评价该类型疟疾的效果的方法是有用的。疫苗。

项目成果

坪井敬文: "マラリア伝搬阻止ワクチンの開発"愛媛医学. 18(3). 353-357 (1999)

Takafumi Tsuboi：“抑制疟疾传播的疫苗的开发”Ehime Medical Science 18(3) (1999)。

Takafumi Tsuboi: "Sequence polymorphism in two novel plasmodium vivax ookinete surface proteins, Pvs25 and Pvs28, that are malaria transmission blocking vaccine candidates"Molecular Medicine. vol.4. 772-782 (1998)

Takafumi Tsuboi：“两种新型间日疟原虫动合子表面蛋白 Pvs25 和 Pvs28 的序列多态性，它们是阻断疟疾传播的候选疫苗”分子医学。