B型肝炎ウイルス受容体の解明と感染制御

乙型肝炎病毒受体的阐明和感染控制

• 批准号: 11138248
• 负责人: 鈴木 康夫
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138248/
• 关键词: B型肝炎ウイルス; 受容体; レセプター; 膵臓がん; ムチン; 糖タンパク質; 肝臓がん

今までに(1)ヒト肝がん細胞由来huGK-14細胞から産生される非感染症小型球形粒子が、B型肝炎ウイルス粒子表面上のHBsAgを介して「ヒト肝臓」組織のほか、「ヒト膵臓」組織にも結合する、(2)ヒト肝臓からHbsAgと特異的に結合する糖タンパク質を見いだし、部分精製に成功した、(3)ヒト膵臓がん細胞由来のムチン画分もHbsAgへと結合する、(4)これらの結合は、糖タンパク質画分やムチン画分を過ヨウ素酸処理、或いはNeuraminidase処理することで消失することなどを明らかにしてきた。今回、下記の点を明らかにした。1)ヒト肝臓糖タンパク質及びヒト膵臓がん細胞ムチン画分は、ABAレクチン(Gal,Galβ1-3GalNAcα 1-Ser/Thr結合特異性)とSSAレクチン(Neu5Ac α 2-6Gal/GalNAc結合特異性)に結合すること。2)上記のレクチンの結合領域は、HBsAgがそれぞれの糖タンパク質に結合する領域に一致していた。ConAレクチンはHBsAgが結合領域には結合しなかったが、粗精製分画中に存在する70kDa以下の夾雑タンパク質に結合していた。3)これらの結果から、我々が見いだしたヒト肝臓糖タンパク質およびヒト膵臓ムチンには、Neu5Ac α 2-6Gal/GalNAc構造があり、HbsAgはこの糖鎖を認識して結合している可能性を明らかにした。4)HbsAgに対する受容体はムチン様糖タンパク質である可能性が判明した。5)ヒト肝臓糖タンパク質免疫マウスからヒト肝臓糖タンパク質とHBsAgとの結合を特異的に阻害する糖鎖認識抗体HK-1を得た。この抗体は今後、HBVの受容体物質の局在を知る上で極めて有用である。一方、ヒト膵臓がん細胞ムチン免疫マウスからヒト膵臓がんムチンに結合性を示す糖鎖認識抗体PK-1を得ることも成功した。

迄今为止，（1）由人肝癌细胞衍生的huGK-14细胞产生的非感染性小球形颗粒已被证明能够用于人体肝脏组织以及通过乙型肝炎表面的HBsAg的人体肝脏组织(2) 一种与人肝脏中的 HbsAg 特异性结合的糖蛋白。 (3) 源自人胰腺癌细胞的粘蛋白部分也与 HbsAg 结合。 (4) 当用高碘酸处理糖蛋白和粘蛋白部分时，这些结合会发生，或者通过神经氨酸酶处理会消失。这次，我们澄清了以下几点。 1) 人肝糖蛋白和人胰腺癌细胞粘蛋白组分是ABA凝集素（Gal,Galβ1-3GalNAcα 1-Ser/Thr结合特异性）和SSA凝集素（Neu5Ac α 2-6Gal/GalNAc结合特异性）结合。 2）上述凝集素的结合区域对应于HBsAg与各糖蛋白结合的区域。 ConA 凝集素不与 HBsAg 结合区域结合，但与粗馏分中存在的小于 70 kDa 的污染蛋白结合。 3) 从这些结果中，我们发现人肝糖蛋白和人胰腺粘蛋白具有 Neu5Ac α 2-6Gal/GalNAc 结构，并且 HbsAg 可能识别并结合该糖链。 4）研究表明，HbsAg 的受体可能是一种粘蛋白样糖蛋白。 5）我们从人肝糖蛋白免疫小鼠身上获得了一种糖链识别抗体HK-1，它特异性抑制人肝糖蛋白与HBsAg之间的结合。这种抗体将来对于了解 HBV 受体物质的定位非常有用。另一方面，我们还从用人胰腺癌细胞粘蛋白免疫的小鼠中成功获得了与人胰腺癌粘蛋白结合的糖链识别抗体PK-1。

项目成果

K. Shikata: "L-selectin and its ligands mediate infiltration of mononuclear cells into kidney interstitium after ureteric obstruction"J. Pathol.. 188. 93-99 (1999)

K. Shikata：“L-选择素及其配体介导输尿管梗阻后单核细胞浸润至肾间质”J。

Sayuri Miyashita: "Development of recombinant B subunit of Shiga-like tomix 1 as a probe to detect carbohydrate ligands in immunochemical and flowcytometric application"Glycoconjugate J.. (in press). (2000)

Sayuri Miyashita：“开发 Shiga 样 tomix 1 的重组 B 亚基作为探针来检测免疫化学和流式细胞术应用中的碳水化合物配体”Glycoconjugate J..（出版中）。

Kazuhisa Fujimoto: "A Macrocyclic sialic acid cluster as a host, as an adsorbate, and as a ligand for lectin and Virus. huaplicin-copper chelates inhibit replication of human influenza viruses"Chemistry Letters. 1259-1260 (1999)

Kazuhisa Fujimoto：“大环唾液酸簇作为宿主、吸附物以及凝集素和病毒的配体。华普菌素-铜螯合物抑制人类流感病毒的复制”《化学快报》。

鈴木康夫: "PSGL-1"臨床免疫. (印刷中). (2000)

铃木康夫：“PSGL-1”临床免疫学（印刷中）。

松下慶蔵: "ザナミビルがわが国のインフルエンザ治療に与えるインパクト"日経メディカル別冊、日経CME. 1月号. 6-15 (2000)

Keizo Matsushita：“扎那米韦对日本流感治疗的影响”日经医学特别版，日经 CME 1 月号（2000 年）。