BおよびC型肝炎ウイルス受容体の解明と感染制御

乙型和丙型肝炎病毒受体的阐明和感染控制

• 批准号: 10151243
• 负责人: 鈴木 康夫
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10151243/
• 关键词: B型肝炎ウイルス; レセプター; 糖鎖; シアル酸; ムチン; 肝臓; 膵臓; 糖タンパク質

ヒトB型肝炎ウイルス小型球形粒子を用いてヒト肝におけるウイルス受容体を調べた。以下に結果の要点を述べる。1) ヒト肝臓より抽出した糖タンパク質画分(human Hepatic glycoprotein:hHGP)に、ヒト肝がん細胞由来huGK-14細胞より産生される非感染症B型肝炎ウイルス小型球形粒子(以下これをHBsAgとする)が特異的に結合することを見い出した。この結果から、今回見いだされたhHGPはヒトB型肝炎ウイルス小型球形粒子の受容体として機能している可能性が示された。2) このHBsAgのhHGPに対する結合には、hHGP中に存在するシアロ糖鎖が必須であることを見いだした。シアロ糖鎖の性状を種々のレクチンを用いて調べた結果、Neu5Ac2-6Gal結合を持つ糖鎖が存在する可能性を見いだした。シアリダーゼ処理により結合活性が消失することからhHGP中のシアル酸残基が結合に重要であることが示唆された。3) hHGPの部分精製に成功した。さらに、HbsAgは、肝臓組織の他、ヒト膵臓組織に結合性を示すことを確認した。4) ヒトB型肝炎ウイルス小型球形粒子は、ヒト膵臓がん細胞のムチン画分にも結合性を示すことを見いだした。以上の結果から膵臓組織にもHBsAg受容体が存在する可能性が示唆された。 ヒト膵臓がん細胞のムチン画分の部分精製に成功した。5) ヒト肝およびヒト膵臓がん細胞から得た糖タンパク質およびムチン画分に対するモノクローナル抗体の作成を達成した。これにより、HBV受容体の組織間分布を知る上で極めて有用なプローブを得ることが出来た。

人类乙型肝炎病毒小球形颗粒用于研究人类肝脏中的病毒受体。结果的要点描述如下。 1)将源自人肝癌细胞的huGK-14细胞(以下称为HBsAg)产生的非感染性乙型肝炎病毒小球形颗粒添加到从人肝脏提取的糖蛋白级分(人肝糖蛋白：hHGP)中。发现该分子与该分子特异性结合。这些结果表明新发现的hHGP可能作为人乙型肝炎病毒小球形颗粒的受体发挥作用。 2) 我们发现 hHGP 中存在的唾液酸聚糖对于 HBsAg 与 hHGP 的结合至关重要。通过使用各种凝集素研究唾液酸聚糖的性质，我们发现了具有Neu5Ac2-6Gal键的糖链存在的可能性。唾液酸酶处理消除了结合活性，表明 hHGP 中的唾液酸残基对于结合很重要。 3) hHGP 的部分纯化成功。此外，已证实HbsAg除了与肝组织外还与人胰腺组织结合。 4) 发现人乙型肝炎病毒小球形颗粒与人胰腺癌细胞的粘蛋白部分结合。这些结果表明 HBsAg 受体也可能存在于胰腺组织中。 我们成功地部分纯化了人胰腺癌细胞的粘蛋白部分。 5) 我们成功地制备了针对从人类肝癌和胰腺癌细胞中获得的糖蛋白和粘蛋白组分的单克隆抗体。结果，我们获得了一种对于了解 HBV 受体的组织分布非常有用的探针。

项目成果

Akiyama,M.: "Identifcation of a major PAF acetylhydrolase in human serum/plasma as a 43 KDa glycoprotein containing about 9 kDa asparagine-containing sugar chain(s)." J.Biochem.123. 786-789 (1998)

Akiyama, M.：“将人血清/血浆中的主要 PAF 乙酰水解酶鉴定为 43 KDa 糖蛋白，其中含有约 9 kDa 含天冬酰胺的糖链。”

Mulligan,M.,: "In vitro and in vivo selectin-blocking activities of sulfated lipids and sulfated sialyl compounds." Int.Immunol.569-575 (1998)

Mulligan，M.，：“硫酸化脂质和硫酸化唾液酸化合物的体外和体内选择素阻断活性。”

Miyamoto,D.,: "Thuaplicin-copper chelates inhibit replication of human influenza viruses" Antiviral Res.39. 89-100 (1998)

Miyamoto,D.，：“Thuaplicin-铜螯合物抑制人类流感病毒的复制”Antiviral Res.39。