腫瘍細切片とGM-CSF遺伝子組換えアデノウイルスを用いた免疫遺伝子治療

使用肿瘤薄片和 GM-CSF 重组腺病毒进行免疫基因治疗

• 批准号: 10877195
• 负责人: 田中 雅夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877195/
• 关键词: アデノウイルス; GM-CSF; 腫瘍ワクチン; 腫瘍細切片

(1)まず、pilotstudyとしてハムスター膵癌細胞(HPD-2NR)とマウス乳癌細胞を用いてGM一CSF遺伝子組換えアデノウイルス感染腫瘍ワクチンの抗腫瘍効果について検討した。それぞれの腫瘍を用いて実験群は以下の3群(n=5)を作成した。(A)対照群:生食皮下投与。(B)照射単独群:膵癌細胞(5×100000)に100Gyの放射線照射のみ行い皮下投与。(C)腫瘍ワクチン群:膵癌細胞(5×100000)にGM-CSF組換えアデノウイルスを感染させ(感染効率:100)、100Gyの放射線照射した翌日にハムスター皮下に腫瘍ワクチンとして投与した群。各群に対して1週間後に腫瘍細胞(1×100000)をchallengeし、腫瘍の生着率とサイズを測定した。【結果】ELISAにて上清中のGM-CSFの発現はA、B群:0であったが、C群:360ng/1000000cells/24hrと高発現が認められた。Challenge後18週の時点で、膵癌の生着率はA、B、C群それぞれ80、40、0%、腫瘍サイズは、15700±10300、690±980、0立方mmと腫瘍の生着率、サイズともに腫瘍ワクチン群で完全に抑制された。乳癌においてもほぼ同様の結果であった。(2)両腫瘍細胞に対してGM-CSF組換えアデノウイルスを用いた腫瘍ワクチンが有効であることが証明されたので、続いて腫瘍細切片を用いた腫瘍ワクチンの実験系にとりかかった。腫瘍細切片をGM-CSF組換えアデノウイルス液に1時間浸し、100Gyで放射線照射を施行した24時間後に上清のGM-CSF濃度をELISAにて測定、GM-CSFが発現されていることを確認した。現在、腫瘍細切片を用いた腫瘍ワクチンの実験を施行中である。

（1）首先，作为一个驾驶员，我们使用仓鼠胰腺癌细胞（HPD-2NR）和小鼠乳腺癌细胞检查了GM 1 CSF遗传腺病毒感染肿瘤疫苗的抗肿瘤作用。每个肿瘤都创建了以下三组（n = 5）。 （a）对照组：原始皮下给药。 （b）单独置换：仅进行胰腺癌细胞（5×100000），仅进行100GE辐射照射和皮下给药。 （c）一组肿瘤疫苗组：胰腺癌细胞（5x100000）感染了GM-CSF重组腺病毒（感染效率：100），第二天在100GE的辐射辐射后，它被作为肿瘤疫苗在Hamster皮肤下施用。一周后，肿瘤细胞（1x100000）被烧伤以测量肿瘤的豪华和大小。 [结果] GM-CSF在上清液中的表达为a，b，但高表达被识别为A和B组：0，但高表达为360 ng/100000000cells/24hr。截至挑战后的18周，胰腺癌的比率为80、40、0％，a，b和c组的每个比率为15700±10300、690±980、0立方mm，肿瘤大小为15700±10300，0％。肿瘤疫苗组完全抑制了两个尺寸。乳腺癌几乎相同。 （2）由于证明了使用GM-CSF重组腺病毒的肿瘤疫苗进行两种肿瘤细胞，因此随后是使用肿瘤狭窄碎片的肿瘤疫苗实验系统。充满肿瘤的碎片浸入GM-CSF重组腺病毒中1小时，并且在100GY以100GY进行辐射辐射后24小时通过ELISA测量上清液的GM-CSF浓度，并表达GM-CSF。我确认了。当前，正在进行使用肿瘤填充物碎片的肿瘤疫苗实验。