DNAプライマーゼ及びテロメラーゼを分子標的としたがん細胞増殖抑制

使用 DNA 引物酶和端粒酶作为分子靶标抑制癌细胞增殖

基本信息

批准号：
10153224
负责人：
吉田松年
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1) 目的従来、制癌剤の分子標的として注目されなかったが重要な機能を果たしているプライマーゼ及びテロメラーゼを標的として、新しい制がん剤を開発する事を本研究の目的とする。2) プライマーゼ我々はスフィンゴシンが強力にプライマーゼを阻害する事を見い出した(Simbulanら,Biochemistry 33:9007,1994).そこでスフィンゴシン異性体、セラミド等関連化合物9種類によるプライマーゼ活性の阻害を試験管内で検討した所、天然スフィンゴシン(trans型)が最も阻害作用が強く、phytoshingosine.N,N-dimethylshingosineがそれに続き、セラミドやスフィンゴミエリンは阻害しなかった。培養ヒト白血病細胞に対してそれらの増殖抑制・アポトーシス誘導を調べたところ、プライマーゼ阻害と増殖抑制とは良い相関を示した(T-Koizumiら,Biochem.Mol.Biol.Int.41:1179,1997)。又、スフィンゴシンをリード化合物として種々の誘導体を化学合成し、構造活性相関を明らかにした(未発表)。3) テロメラーゼ阻害剤:ラット腹水肝がん細胞より数段階のカラムクロマトグラフィーで高度に精製したテロメラーゼを用いて阻害剤のスクリーニングを行った。多種類の合成化合物の中から、強いテロメラーゼ阻害を示す化合物6種類を得た。その中の4種類はイソチアゾロンの誘導体であった。最も強く阻害活性を示した2-[3-(trifluoromethyl)phenyl]isothiazolin-3-one(TMPI)について阻害機構を調べた。テロメラーゼ活性測定系としては改良TRAP法を用いた。TMPIはテロメア配列を有する一次プライマーと非競合的に、またdNTPとほぼ競合的(mixed type)に反応を阻害した。Ki値は2.5μMであった(論文投稿中)。本化合物の培養細胞にたいする影響を検討している。

1）目的是，本研究的目的是开发一种新的癌症剂作为原始酶和恐怖主义酶的靶标，尚未将其视为癌剂分子靶标的分子靶标。 2）我们发现，鞘氨酸强烈抑制原始酶（Simbulan等人，生物化学33：9007,1994）。天然链丁氏素（反式）是最抑制的作用，其次是植物学，N-二甲基甲基辛糖苷，而不是抑制神经酰胺和自旋垃圾衬里。在检查了培养人白血病细胞的增殖和凋亡诱导后，它显示了培养基抑制与增殖性抑制之间的良好相关性（T-Koizumi等，1997）。此外，使用链氨烷作为铅化合物对各种衍生物进行化学合成，并揭示了结构活性相关性（未发表）。 3）Teromerase抑制剂：使用高度纯化的thermodog或柱色谱法进行了抑制剂的大鼠升华。在各种合成化合物中，获得了六种表现出强烈的端粒酶抑制作用的化合物。其中四个是缺血衍生物。检查了2- [3-（三氟甲基）苯基]异噻唑啉-3-one（TMPI）（TMPI）的抑制机制。改进的陷阱方法用作端粒酶活性测量系统。 TMPI对端粒序列响应了主要底漆，并且几乎用DNTP对混合类型做出了反应。 KI值为2.5μm（在发布论文时）。我们正在研究该化合物的培养细胞的作用。