ヒト透過性細胞を用いたDNA複製装置の免疫組織化学的解析

使用人透化细胞对 DNA 复制装置进行免疫组织化学分析

基本信息

  • 批准号:
    12218217
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.56万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は、Rb蛋白の低リン酸化型が転写を抑制して細胞周期を負に調節するのに対して、高リン酸化型RbはDNAポリメラーゼαの活性を促進する事によりS期の進行に正の調節をする可能性を示した。今年度は、高リン酸化Rb蛋白の核内局在を特異抗体を用いて解析した結果、807番目あるいは811番目のセリン残基がリン酸化されたRb蛋白は、ヒト正常繊維芽細胞においてS期の進行に伴って量が増大し、さらにS期の中期から後期にかけて核小体へと移行することを見い出した。一方、DNAポリメラーゼの複製忠実度がヒト癌細胞においてもmutator phenotypeをもたらし、発がんに関与しているとの仮説を検証するため、ヒト癌組織からDNAを抽出してDNAポリメラーゼα、δ、εの複製忠実度に関与するドメインの変異に焦点を当て変異を検出すべくスクリーニングを開始した。予備的な結果として7ケ所のターゲットのうちイントロン部位に複数の変異(おそらくSNP)を見い出した。エキソン部位については癌特異的な変異の存在につき検討中である。
我们,低磷酸化的RB蛋白抑制转录并调节细胞周期,而高磷酸化的RB通过促进DNA聚合酶α的活性来对S期的进展正确。今年,由于使用特定的抗体分析了高磷酸化的RB蛋白的核位置,其中811或第811个残基被磷酸化的RB蛋白,RB蛋白是人类正常成纤维细胞的S时期的量增加了,并且已经发现它将从中间的中部转移到核核。另一方面,为了验证以下假设:即使在人类癌细胞中,DNA聚合酶的复制也是突变型表型,也从人类癌组织和DNA聚合酶α,δ,ε,ε,ε,δ,ε中提取DNA。 ,δ,δ,δ,δ,δ,δ,δ,δ,ε。作为初步结果,我们在七个目标中的内含子位点发现了多个突变(可能是SNP)。在考虑存在癌症特异性突变的情况下正在考虑。

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Okada Yoshito: "Assignment of functional amino acids around the active site of human DNA topoisomerase II α."J.Biol.Chem.. 275(32). 24630-24638 (2000)
Yoshito Okada:“人 DNA 拓扑异构酶 II α 活性位点周围的功能酸氨基酸分配”。J.Biol.Chem.. 275(32) (2000)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Mizushina Yoshiyuki: "Dehydroaltenusin : a mammalian DNA polymerase alpha inhibitor."J.Biol.Chem.. 275. 33957-33961 (2000)
Mizusina Yoshiyuki:“脱氢altenusin:一种哺乳动物DNA聚合酶α抑制剂。”J.Biol.Chem.. 275. 33957-33961 (2000)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Sakaguchi Kenji: "DNA polymerase and Ki-67 nuclear antigen are induced in correlation with the resected mass of rat liver up to 90%."Langenbeck's Arch.Surg.. 385. 135-142 (2000)
坂口%20健二:%20“DNA%20聚合酶%20和%20Ki-67%20核%20抗原%20是%20诱导%20in%20相关性%20与%20%20切除%20质量%20of%20rat%20肝脏%20up%20至%2090%。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Nozawa Katsura: "In vitro expansion of mammalian telomere repeats by DNA polymerase α-primase."Nucleic Acids Research. 28(16). 3117-3124 (2000)
Nozawa Katsura:“通过 DNA 聚合酶 α-引物酶体外扩增哺乳动物端粒重复序列。”28(16) 3117-3124 (2000)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Suzuki,M.: "Thermus aquaticus DNA polymerase I mutants with altered fidelity. INTERACTING MUTATIONS IN THE O-HELIX."J Biol Chem.. 275. 32728-32735 (2000)
Suzuki,M.:“保真度改变的栖热菌 DNA 聚合酶 I 突变体。O 螺旋中的相互作用突变。”J Biol Chem.. 275. 32728-32735 (2000)
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  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
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    $ 2.56万
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    $ 2.56万
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