ペスチウイルスの持続感染及び病態形成メカニズムの解明

阐明瘟病毒的持续感染和发病机制

基本信息

批准号：
06J11533
负责人：
山根大典
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

牛ウイルス性下痢ウイルス(BVDV)による持続感染は発育遅延や免疫抑制を引き起こし、養牛農家の経営上大きな問題となっている。これまでの研究により、持続感染牛の臨床徴候や先天性免疫反応レベルはウイルスRNAの蓄積量と正の相関関係にあることが判明し(Yamane et al.,2008,Vet.Microbiol.)、また、マイクロアレイを用いた解析により、ウイルス複製によって誘導されるアポトーシスは細胞型によって異なる経路を介していることが明らかとなった。線維芽細胞は細胞病原性BVDV感染によりインターフェロン依存経路が顕著に誘導されるが、上皮系細胞においては小胞体ストレス経路が強く誘導されていることを報告した(Yamane et al.,Virus Res.in press)。このように、これまでウイルス複製によって誘導される細胞応答をin vitro及びin vivoにおいて明らかとしてきたが、効率的なウイルス複製に必要な宿主-ウイルス間相互作用を解明するため、昨年度同定したスフィンゴシンキナーゼ1(SphK1)とウイルス非構造タンパクNS3との相互作用の複製における意義について解析を進めた。NS3はSphK1活性を抑制し、それがウイルス複製の増強につながることまで昨年度報告したが、更なる解析により、SphK1活性抑制によってもたらされるスフィンゴ脂質組成の変化がウイルス複製の足場形成を促進することに繋がることが示された。また、生存因子であるSphK1の抑制はアポトーシス誘導の増強にも深く関与していることが明らかとなった。以上の結果から、NS3はセリンプロテアーゼやRNAヘリガーゼとしての機能のみならず、SphK活性の抑制を介してスフィンゴ脂質組成を制御し、ウイルス複製及び細胞病原性発現に深く関与していることが示された(Yamane et al.,J.Biol.Chem.in press)。

牛病毒性腹泻病毒（BVDV）持续感染会导致生长迟缓和免疫抑制，给养牛户带来重大管理问题。先前的研究表明，持续感染牛的临床症状和先天免疫反应水平与病毒 RNA 积累量呈正相关（Yamane 等，2008，使用微阵列的分析表明病毒复制诱导细胞凋亡）。根据细胞类型，通过不同的途径介导。我们报道，致细胞病变的 BVDV 感染在成纤维细胞中显着诱导干扰素依赖性途径，而在上皮细胞中强烈诱导内质网应激途径（Yamane 等人，Virus Res. press）。到目前为止，我们已经阐明了病毒在体外和体内复制引起的细胞反应，但为了阐明有效病毒复制所需的宿主-病毒相互作用，我们开发了一种鞘氨醇激酶，我们于去年分析了该激酶。 SphK1 (SphK1) 和病毒非结构蛋白 NS3 在复制中相互作用的重要性。去年，我们报道了NS3抑制SphK1活性，从而导致病毒复制增强。进一步的分析表明，抑制SphK1活性引起的鞘脂组成的变化促进了病毒复制的支架形成。研究还表明，生存因子 SphK1 的抑制与增强细胞凋亡诱导密切相关。上述结果表明，NS3不仅起到丝氨酸蛋白酶和RNA解旋酶的作用，而且还通过抑制SphK活性来控制鞘脂组成，并深入参与病毒复制和细胞致病性的表达（Yamane et al., J. Biol.化学。