癌胎児性抗原(CEA)のPIアンカーグリカン部における癌性変化

癌胚抗原 (CEA) PI 锚定聚糖部分的癌变

基本信息

批准号：
07780519
负责人：
福島慶子
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Sasaki Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸癌の肝転移巣から精製したCEA(癌胎児性抗原)と成人大人糞便中より精製したNFA-2のN-結合型糖鎖の構造を比較解析した。その結果、NFA-2は、Type I型の1〜4本鎖複合型糖鎖を骨格としてシアル酸、フコース、硫酸による修飾を受けている。一方、CEAは、高マンノース型糖鎖を含む他、Type II型の複合型糖鎖を骨格としており、さらにシアル酸、硫酸の結合様式の変化、フコシル化の昂進といった癌性変化が見出された(Glycobiology,5,105-115)。特に、シアル酸の結合様式の変化を基にして、これを検出し得るキカラスウリレクチン-I(TJA-I)を用いて、大腸癌及び正常組織を組織染色により判別しうるという成果を得、診断法開発に向けて発展している(Cancer Res.55,1675-1679)。さて、CEAのGPIアンカー糖鎖構造を調べるため、CEAをプロナーゼ消化後、亜硝酸分解してNaB^3H_4でGPIアンカーをトリチウム標識した。高圧ろ紙電気泳動を行うと、シアリダーゼ処理の前後で挙動が変化することからGPIアンカー部がシアル酸による修飾を受けていることが示された。また、キカラスウリレクチン-II(TJA-II)と結合する分子種が存在することからフコシル化されていることも明らかになった。さらにMALDI-MS質量分析計のデータからも、GPIアンカー糖鎖がN-結合型糖鎖同様、様々な修飾を受けていることを示しており、今後、詳細な解析を行い、その全貌を明らかにしたいと考えている。

我们比较了从结直肠癌肝转移中纯化的 CEA（癌胚抗原）和从成人粪便中纯化的 NFA-2 的 N 连接糖链结构。结果，NFA-2 以 I 型 1 至 4 链复合糖链为骨架，用唾液酸、岩藻糖和硫酸进行修饰。另一方面，CEA除了含有高甘露糖糖链外，还具有II型复杂糖链的主链，并且发现了癌变，例如唾液酸和硫酸的结合方式发生改变，岩藻糖基化增加等（糖生物学，5, 105-115）。特别是，我们获得了使用Chikarasuuri凝集素-I（TJA-I）进行组织染色来区分结直肠癌和正常组织的结果，该技术可以根据其结合模式的变化来检测唾液酸，目前正在开发中。诊断方法（Cancer Res. 55, 1675-1679）。现在，为了研究CEA的GPI锚定糖链结构，用链霉蛋白酶消化CEA，用亚硝酸盐分解，并用NaB^3H_4对GPI锚定进行氚标记。进行高压滤纸电泳时，唾液酸酶处理前后行为发生变化，表明GPI锚定区被唾液酸修饰。此外，与 Chikara urellectin-II (TJA-II) 结合的分子种类的存在表明它是岩藻糖基化的。此外，MALDI-MS 质谱仪数据还显示，GPI 锚定糖链与 N 连接糖链一样，经历了各种修饰，我们将进行详细分析，以阐明我正在考虑的整个情况。