線維化に伴う血清糖のタンパク質の癌鎖構造変化の機構と機能

纤维化相关血清糖蛋白癌链结构变化的机制和功能

基本信息

批准号：
05770106
负责人：
福島慶子
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Sasaki Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ウイルス性肝障害は肝炎から肝硬変、肝癌へと進展することが多い。著者のグループでは肝炎から硬変化(線維化)に伴い血清中にフコシル化されたコリンエステラーゼが顕著に上昇し、これが肝硬変、肝癌への進展の良い示標となる可能性を示した(1993)。この糖鎖変化の実体を明らかにするため、同様の変化が認められるトランスフェリン(Tf)の糖鎖の構造を解析した。まず、健常人、肝硬変、肝癌患者血清より抗Tf抗体カラムを用いてTfを精製し、透析後クロマトフォーカシング(pH6.2-5.0)によりシアル酸の結合数の違いによりS_3、S_4、S_5イソフォームを分離した。健常人TfはS_4のみであった。これらのイソフォームそれぞれ100mugからヒドラジン分解によりAsn結合型糖鎖を遊離させ、N-アセチル化後、NaB〔^3〕_4により還元末端をトリチウム標識した。これらの糖鎖をMonoQカラムクロマトグラフィー、レクチルカラムクロマトグラフィー、Bio-Gel P4ゲルろ過カラムクロマトグラフィーなどにより分析した結果、健常人、肝硬変、肝癌患者ともTfS_4はジシアリル2本鎖であった。一方、肝硬変、肝癌患者のS_5の糖鎖はC-2,6分岐した3本鎖と2本鎖がほぼ等モルであり、どちらも全れの側鎖にシアル酸が結合していた。肝硬変患者では健常人TFにはほとんど認められないFucalpha1→3結合側鎖が増加し、シアリルルイスX構造が出現していることが明らかになった。ところが肝癌患者のS_5ではルイスX構造が減少していた。細胞の線維化に伴うシアリルルイスX糖鎖が炎症時に白血球と血管内皮細胞の接着に関与している細胞接着因子ELAM-1が認識するエピトープと同じであるかどうか興味があり、シアリルalpha2→?Galbeta1→4(Fucalpha1→3)GicNAc含有糖鎖が、線維化においても何らかの細胞間相互作用を調節している可能性が考えられる。なお、ブレオマイシン投与による実験的肺線維症ラットの血清Tfにおいても類似の変化が認められ、現在詳細な解析を行なっているところである。

病毒肝疾病通常从肝炎发展为肝硬化和肝癌。在作者的组中，胆碱酯酶因肝炎（纤维化）而蓬松的肝炎蓬松，这可能是明显增加的，这可能是肝硬化和肝癌的重要指标（1993）。为了阐明糖链的实质，分析了具有相似变化的透透糖链（TF）的结构。首先，使用来自健康人员，肝硬化或肝癌患者血清的抗TF抗体柱进行完善的TF，以及透析后，染色体（ph6.2-5.0）可能是S_3，S_3，S_4，S_4，S_5同工型，因为差异唾液酸的结合。唯一健康的TF是S_4。对于每种同工型，将ASN结合型糖链从100杯中分离出来，在N-乙酰化后，返回端由NAB [^3] _4签名。通过MonoQ色谱分析这些糖链，插入的柱色谱法，Bio-Gel P4凝胶过滤柱色谱法等，健康的人，肝硬化和肝癌患者TFS_4都是两个Zician Rill。另一方面，肝硬化和肝癌患者的S_5糖链几乎等于C-2和6分支，并且两者都与所有侧链结合。就肝硬化患者而言，在健康人员中很少认识到的Fucalpha1→3结合侧链已经增加，并且已经显示出出现了Ciallluis X结构。然而，在患有肝癌的患者S_5中，路易斯X结构正在减少。与细胞纤维化相关的cyaralluris X糖链与细胞粘附因子ELAM-1识别的表位相同，ELAM-1涉及白细胞和血管内皮细胞在炎症期间，CiAlyl alpha2→4（Fucucalpha1→3）含GICNAC的糖链可能已经调整了纤维化中的一些细胞间相互作用。在实验性肺纤维化大鼠的血清TF中，通过乳霉素的给药也发现了类似的变化，目前正在进行详细的分析。