細胞膜結合型増殖因子変換酵素,セクレターゼの遺伝子発現クローニング

细胞膜结合生长因子转换酶分泌酶的基因表达克隆

• 批准号: 06780483
• 负责人: 東山 繁樹
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780483/
• 关键词: HB-EGF; セレクターゼ; ジャクスタクリン活性; PKC

我々が、近年同定したヘパリン結合性EGF様増殖因子(HB-EGF)は、EGFファミリーに属し、膜結合型分子(pro型)として合成され、細胞表面に発現した後、プロセッシングを受けて分泌型HB-EGFとなり、パラクリン因子として作用する。このプロセッショシングを司る酵素セレクターゼの同定を目ざして、まずその特性について検討し、以下の結果を得た。1)HB-EGFセクレターゼの活性化は、プロテインキナーゼを介する経路で制御を受けている。2)HB-EGFセクレターゼは、proHB-EGFの細胞内ドメインを知識し、細胞外領域の-pro^<48>-Val^<149>-部位を切断する。3)proHB-EGFプロセッシングは、低分子量G蛋白質rhoの阻害剤であるボツリヌスC_3酵素によって阻害を受けることから、このプロセッシング機構にrhoが関与していることが示唆される。4)HB-EGFセクレターゼは、HB-EGFをジャクスタクリン因子からパラクリン因子へと効率よく変換する。現在、HB-EGFセクレターゼの蛋白質の同定と遺伝子の単離を試みている。

我们最近鉴定出的肝素结合型EGF样生长因子（HB-EGF）属于EGF家族，被合成为膜结合分子（原型），在细胞表面表达，然后加工成分泌型它变成 HB-EGF 并充当旁分泌因子。为了确定控制此过程的酶选择酶，我们首先研究了其特性并获得了以下结果。 1) HB-EGF 分泌酶的激活受蛋白激酶介导的途径调节。 2)HB-EGF分泌酶知道proHB-EGF的胞内结构域并切割胞外区域中的-pro^<48>-Val^<149>-位点。 3) proHB-EGF加工受到肉毒杆菌C_3酶的抑制，肉毒杆菌C_3酶是低分子量G蛋白rho的抑制剂，表明rho参与了该加工机制。 4) HB-EGF分泌酶有效地将HB-EGF从近分泌因子转化为旁分泌因子。目前，我们正在尝试鉴定HB-EGF分泌酶蛋白并分离该基因。

项目成果

Higashiyama,S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the juxtacrine growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF)." J.Cell Biol.(in press). (1995)

Higashiyama,S.：“膜蛋白 CD9/DRAP27 增强膜锚定肝素结合 EGF 样生长因子 (HB-EGF) 的近分泌生长因子活性。”

Miyagawa,J.: "Localization of heparin-binding EGF-like growth factor in the smooth muscle cells and macrophages of human atherosclerotic plaques." J.Clin.Invest.95. 404-441 (1995)

Miyakawa, J.：“肝素结合 EGF 样生长因子在人类动脉粥样硬化斑块的平滑肌细胞和巨噬细胞中的定位。”

Hashimoto,K.: "Heparin-binding EGF-like growth factor is an autocrine growth factor for human keratinocytes." J.Biol.Chem.269. 20060-20066 (1994)

Hashimoto,K.：“肝素结合 EGF 样生长因子是人类角质形成细胞的自分泌生长因子。”