膜結合型増殖因子と受容体型チロシンキナーゼを介したがん細胞の浸潤制御機構

膜结合生长因子和受体酪氨酸激酶介导的癌细胞侵袭控制机制

基本信息

批准号：
13216057
负责人：
東山繁樹
金额：
$ 35.84万
依托单位：
Ehime University (2002-2004)Osaka University (2001)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

代表者の東山らは、松原、森本とともに膜結合型増殖因子HB-EGFのプロセシング酵素ADAM12の細胞内ドメインに結合する蛋白質としてPACSIN3とEve-1を同定した。SiRNAによるPACSIN3とEve-1のノックダウンは共にTPAとAngIIによるHB-EGFのプロセシング誘導を効果的に抑制した。一方、HB-EGFのプロセシングによるカルボキシ末端断片(HB-EGF CTF)の産生は細胞周期のG1後期に起こり、PLZFの核外移行はS期後期に起こることをLasar scanning cytometry (LCS)を用いた解析により明らかにし、HB-EGF-Cシグナルが細胞周期の進行と深く関わることを示唆した。今後、これらの分子の解析からより詳細なADAM12を含むADAMの活性化機構が明らかにできるものと期待できる。またHB-EGF CTFシグナルによる細胞周期制御機構の解析は、今後新たな細胞増殖制御の分子機構の側面を明らかにできると考えている。研究分担者の佐々木らは、がん細胞の浸潤・転移機構について、膜蛋白質である細胞間接着分子の細胞内小胞輸送に注目した解析を行った。これまでに、上皮細胞のタイトジャンクション(TJ)を構成する接着分子claudinがゴルジ体から細胞膜に運ばれる過程や今一つのTJ接着分子occludinが細胞膜から細胞内に取り込まれ、再び細胞膜へリサイクリングされる過程をRab13低分子量G蛋白質(Rab13)が制御することを明らかにしてきた。本研究では、TJ接着分子の輸送を制御するRab13の標的蛋白質としてJRABを同定した。

代表 Higashiyama 等人与 Matsubara 和 Morimoto 一起，将 PACSIN3 和 Eve-1 鉴定为与 ADAM12 胞内结构域结合的蛋白质，ADAM12 是膜结合生长因子 HB-EGF 的加工酶。 SiRNA 敲低 PACSIN3 和 Eve-1 均能有效抑制 TPA 和 AngII 对 HB-EGF 加工的诱导。另一方面，我们使用激光扫描细胞术（LCS）显示，通过加工HB-EGF产生羧基末端片段（HB-EGF CTF）发生在细胞周期的G1期晚期，并且核输出PLZF 发生在 S 期晚期。我们的分析表明 HB-EGF-C 信号与细胞周期进程密切相关。未来，预计对这些分子的分析将揭示ADAM（包括ADAM12）更详细的激活机制。我们还相信，通过HB-EGF CTF信号分析细胞周期控制机制将揭示细胞生长控制分子机制的新方面。共同研究员Sasaki等人对癌细胞的侵袭和转移机制进行了分析，重点关注细胞间粘附分子（膜蛋白）的细胞内囊泡运输。到目前为止，我们已经报道了构成上皮细胞紧密连接（TJ）的粘附分子claudin从高尔基体转运到细胞膜的过程，以及另一种TJ粘附分子occludin的过程。从细胞膜进入细胞并再循环回到细胞膜，我们已经证明这一过程受到 Rab13 低分子量 G 蛋白（Rab13）的调节。在这项研究中，我们确定 JRAB 是 Rab13 的靶蛋白，它调节 TJ 粘附分子的运输。