ヒト子宮内膜癌の多段階発癌の検討

人类子宫内膜癌多阶段癌变的检查

基本信息

批准号：
05770113
负责人：
笹野公伸
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

子宮内膜病変の遺伝子変化に関与する検索として腫瘍抑制遺伝子、癌遺伝子の変化を検討した。腫瘍抑制遺伝子としてはp53がPCR-SSCP法によりexon5からexson8までの遺伝子変異の有無を検討すると29例中5例(17.9%)で変異を認めた。又遺伝子異変をよく反映するp53の免疫組織化学では単クローン抗体007を用いて33例中15例(45%)と比較的高い頻度で陽性所見を認めた。又組織学的分化度が低くなるほどp53の異変は高率で観察された。又このp53の陽性細胞ではmRNA発現亢進を伴っていない事をin situ hybridizationで証明した。p53の異変は内膜癌の前癌病変とも考えられている内膜増殖症では認められなかった。これに対して癌遺伝子であるK-rasの変異は、内膜癌272例中28例(10.3%)でcodon12又は13の点突然変異が観察され、異型増殖症で9例中1例に認められている。この事からp53の変異は、癌化過程の比較的後期で生じてくるのに対してK-rasの変化は異型増殖症を含む早期からおこっている事が示唆された。アンドロゲンをエストロゲンに転換させるaromataseは子宮内膜病変70例で、発現、および生化学的活性も含めて多角的に検討した。aromataseは正常、子宮内膜増殖症では発現、活性共にほとんど見られないが、癌症例では^3H-water法で検討した活性が認められてきた。免疫組織化学、in situ hybridization法でaromatase発現の局在生を観察してみると、腫瘍細胞ではなく腫瘍包巣周囲の間質細胞で蛋白、mRNA双方のレベルで発現していた。この事は、子宮内膜病変で血中のアンドロゲンからエストロゲンに転移させて局所のエストロゲン濃度を高めるaromataseの発現は癌化のプロセスと深く関係しており、腫瘍局所でin situに産生されたエストロゲンはparacrine的に内膜癌細胞の増殖に関与している事が考えられた。現在癌遺伝子、腫瘍抑制遺伝子の変異とaromatase発現の関係を検討中である。

随着涉及子宫内膜病变遗传变化的搜索，研究了肿瘤抑制基因和癌基因的变化。作为肿瘤抑制基因，使用PCR-SSCP方法检查了从外部5到Exson8的存在或不存在的29例（17.9％）中的5例（17.9％）突变p53。此外，在33例（45％）中的15例中，使用单克隆抗体007，使用单克隆抗体007观察到p53的免疫组织化学（密切反映遗传改变），使用单克隆抗体007观察到了相对较高的阳性频率。此外，组织学分化的程度越低，观察到p53异常率较高。此外，原位杂交证明，p53阳性细胞不伴有mRNA表达增加。在子宫内膜增生中未观察到p53异常，这也被认为是子宫内膜癌的癌前病变。相反，在272例子宫内膜癌病例中有28例（10.3％）中已经观察到了癌基因K-RAS的突变，并且在非典型非典型增生的9例中，已经观察到CODON12或13的点突变。这表明p53突变在癌症过程中相对较晚，而K-RAS的变化发生在早期，包括非典型增生。芳香酶从多种角度研究了将雄激素转化为雌激素，包括70例子宫内膜病变病例中的表达和生化活性。尽管芳香酶是正常的，在子宫内膜增生的表达和活性中几乎没有看到，但已经观察到在癌症病例中已经观察到了通过 ^3H水方法检查的活性。当我们使用免疫组织化学和原位杂交观察到芳香酶表达的定位时，它在肿瘤切开的基质细胞中均以蛋白质和mRNA水平表达，而不是肿瘤细胞。这表明，芳香酶的表达将血液雄激素转移到子宫内膜病变中的雌激素，增加局部雌激素水平，与癌症形成过程密切相关，而在局部肿瘤的原位产生的雌激素则与旁分泌有关，与子宫内膜癌细胞的增殖有关。目前，我们正在研究癌基因与肿瘤抑制基因与芳香酶表达的突变之间的关系。