幹細胞性白血病の分子生物学的特性に関する研究

干细胞白血病的分子生物学特征研究

• 批准号: 02670284
• 负责人: 原田 実根
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 1992
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670284/
• 关键词: 幹細胞性白血病; CD34; CD7; 9番染色体長腕欠失; 細胞株; IL-3; SCF; 幹細胞白血病; 9番染色体長腕決失; CMMoL; インタ-ロイキン4; インタ-ロイキン6; 免疫グロブリン遺伝子; T細胞受容体遺伝子

表面マーカーCD34、CD7陽性の幹細胞性白血病細胞について、サザンブロット法で免疫グロブリン遺伝子、T細胞受容体遺伝子の再構成を検索したが、いずれも認められなかった。この幹細胞性白血病細胞をヌードマウスに接種し、白血病細胞性の樹立を試みている。細胞株がまだ樹立されないため、幹細胞性白血病にみられたdel(9)(qllq22)の染色体異常に関する分子生物学的特性の解明や第9染色体上の切断部位の遺伝子クローニングは進んでいない。急性骨髄性白血病でしばしば観察される癌遺伝子rasの点突然変異をサザン法による再構成の有無、スロットブロット法による増幅の有無、ノーザン法による活性化の有無を検討したが、その存在は認められなかった。ついで、幹細胞性白血病細胞のサイトカイン要求性を検討した。急性骨髄性白血病連続88例中9例がCD34、CD7陽性、ペルオキシダーゼ陽性であった。検討したサイトカイン、インターロイキン3(IL-3)、顆粒球/単球コロニー刺激因子(GM-CSF)、顆粒球コロニー刺激因子(G-CSF)のうち、IL-3が白血病芽球のDNA合成、芽球コロニー形成に対して最も強い刺激効果を示した。一方、CD7陰性の白血病細胞に対するIL-3の刺激効果はわずかであった。さらに、IL-3に反応したCD陽性白血病について、最も未熟な造血幹細胞に作用するstem cell factor(SCF)の効果を検討したところ、SCFがIL-3よりも強い刺激効果を示した。また、SCFは芽球コロニー形成においてIL-3と相乗効果を発揮した。以上の成績より、幹細胞性白血病は未熟な造血幹細胞の生物学的特性を反映していると考えられる。

使用Southern印迹搜索表面标记CD34和CD7阳性干细胞白血病细胞以进行免疫球蛋白基因和T细胞受体基因的重排，但没有发现它们。这些干细胞白血病细胞接种裸鼠，并试图建立白血病细胞特性。由于尚未建立细胞系，因此在干细胞白血病中DEL（9）（QLLQ22）中染色体异常的分子生物学特性阐明了染色体9染色体上裂解位点的基因克隆的基因克隆。经常在急性髓样白血病中观察到的癌基因RAS中的点突变，检查了南部是否存在或不存在重排，通过插槽斑点进行扩增和北部的激活，但没有观察到其中一个。然后检查干细胞白血病细胞的细胞因子需求。在88例急性髓样白血病的连续病例中，有9例是CD34，CD7阳性和过氧化物酶阳性。在所检查的细胞因子中，白介素3（IL-3），粒细胞/单核细胞集落刺激因子（GM-CSF）和粒细胞群刺激因子（G-CSF），IL-3显示出对白血病爆炸DNA的合成和胚泡的最强刺激作用。另一方面，IL-3对CD7阴性白血病细胞的刺激作用很小。此外，当我们研究了作用于最不成熟的造血干细胞的干细胞因子（SCF）的作用时，对IL-3反应的CD阳性白血病中的作用时，我们发现SCF比IL-3具有更强的刺激作用。 SCF在爆炸菌落形成中也表现出与IL-3的协同作用。基于上述结果，人们认为干细胞白血病反映了未成熟造血干细胞的生物学特性。

项目成果

Teshima T: "Characterization of CD7+,CD4+ and HLDーDR+ leukemic basophil progenitors from chronic myelogenous leukemia." Brit.J.Haematol.(1991)

Teshima T：“慢性粒细胞白血病 CD7+、CD4+ 和 HLD-DR+ 白血病嗜碱性粒细胞祖细胞的特征。Brit.J.Haematol.(1991)

Akashi K.et al: "Interstitial 9q deletion in T lymphoid/myeloid biphenotypic leukemia" Br J Haematol. 80. 172-177 (1992)

Akashi K. 等人：“T 淋巴/骨髓双表型白血病中的间质 9q 缺失”Br J Haematol。

Harada M: "Role of interleukinー4 in the negative regulation of proliferation of chronic myelomonocytic leuke" Ann N Y Acad Sci. 628. 156-164 (1991)

Harada M：“白细胞介素 4 在慢性粒单核细胞白血病增殖的负调控中的作用”Ann N Y Acad Sci 628. 156-164 (1991)

Akashi K: "Effect of interleukinー4 and interleukinー6 on the proliferation of CD34+ and cd34ーblasts from acute myelogenous leukemia." Blood. 78. 197-204 (1991)

Akashi K：“白细胞介素 4 和白细胞介素 6 对急性髓性白血病 CD34+ 和 CD34 母细胞增殖的影响。”78. 197-204 (1991)

Akashi K: "Myeodysplastic syndrome and cytokines." Elsevier Science Publishers, 10 (1991)

Akashi K：“骨髓增生异常综合征和细胞因子。”