大腸菌のDNA複製終了・分配・細胞分裂過程及びこれを調節する遺伝子群の構造と機能

大肠杆菌 DNA 复制、分布和细胞分裂过程的终止，以及调节这些过程的基因的结构和功能

基本信息

批准号：
62615520
负责人：
三木健良
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62615520/
关键词：
大腸菌 Fプラスミド細胞分裂 DNA複製 DNA塩基配列 letA遺伝子 letD遺伝子 groES遺伝子

项目摘要

大腸菌の細胞分裂開始の誘導機構を分子レベルで明らかにすることを目的として本研究を行った. 大腸菌においては, 細胞分裂の開始には染色体DNA複製が終了することが必要である. 同様に, ある種のプラスミドを持つ大腸菌においては, 染色体DNAに加えて, プラスミドDNAの複製が行われることが必要である. F因子の場合, この調節はF因子上の2つの遺伝子, letAとletDにより調節されている. 本年度は, この調節に宿主大腸菌のgroES, groEL遺伝子が関与していることを見いだしたので報告する.1.F因子の細胞分裂抑制(letD)蛋白質の標的蛋白質を同定するため, F因子letA変異株に耐性を示し(Tdi表現型) 同時に増殖が温度感受性となる変異株を分離した. 分離頻度より計算して, 分離可能な全ての遺伝子の変異株が分離されたと考えられる. 得られた変異は, 相補し得る組み換えプラスミドにより, tdiA, tdiB, tdiFの3群に分離された.2.tdiA変異を相補するDNA断片の塩基配列を決定し, その配列を既報の大腸菌遺伝子の塩基配列と比較したところ, 一つの読み枠の上流の塩基配列がgroES遺伝子のプロモーター領域の塩基配列とよく一致した. この読み枠が, groES遺伝子であることは, この領域を持つDNAが, groES変異を相補することにより確認した. tdiA変異が, groES遺伝子の変異であることは, P1ファージを用いた形質導入実験と, miniFプライムを用いた相補性試験により確認した. tdiA6変異株の高温に於ける増殖を調べたところ, 隔壁形成の初期過程が阻害を受けていることが明かとなった. これらの結果は, GroES蛋白質がLetD蛋白質の標的であるか, LetD蛋白質と標的蛋白質との相互作用に欠くことが出来ない蛋白質であることを示唆している.3.tdiBは相補製試験により, groEL遺伝子変異である事が明かとなった. groEL変異はGroES蛋白質を介してLetD蛋白質に作用しているものと考えられる.

这项研究是为了阐明大肠杆菌在大肠杆菌中的细胞分裂的诱导机制。在F系数的情况下，某些质粒除染色体DNA外，还必须在F因子上进行调整一年，我们发现宿主的gro吟和凹槽基因参与了这种调整。同时，所获得的突变已分为三组TDIA，TDIB和TDIF基础序列，一个阅读框架上游的基础序列与GROES基因的启动子区域的基础序列一致。使用Minif Prime的互补测试。目标蛋白表明，它是一种不能作用的蛋白。3.TDIB表明互补测试是groel基因突变。完毕。