DNA高次構造構築に関与する大腸菌遺伝子の検索

寻找参与 DNA 构象构建的大肠杆菌基因

基本信息

批准号：
08640789
负责人：
三木健良
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08640789/
关键词：
DNA高次構造 DNAの長さ分配 letB遺伝子 sopB遺伝子大腸菌 F因子プラスミド

项目摘要

本研究の目的と戦略本研究の目的は、大腸菌においてDNAの高次構造体(核様体)構築に関与する遺伝子とその機能を明らかにすることにより、高次構造体構築の分子機構を解明することである。戦略として、大腸菌Fプラスミドの分配過程において、F因子の「セントロメア」incDの領域が、「分配蛋白質」SopBと結合し、「ヌクレオプロテイン構造」を形成するというBiek、Wangらの報告を土台に、この過程に関与する遺伝子を同定するという方法を取ることとした。このため、我々が分離したF因子分配遺伝子sopBの変異letB84が、プラスミドの長さに依存して宿主細胞の増殖を阻害するという現象に注目し、その機構を解明すると共に、この変異を抑圧し得るサプレッサーやマルチコピーサプレッサーを分離し、この過程に関与する遺伝子を同定しその機能を解析することとした。研究成果(1)F因子分配遺伝子sopB(letB)に変異を持つ場合、プラスミドDNAの長さに依存してプラスミドの脱落が起こること、即ち、プラスミドDNAが長ければ長いほど(>数10μm)プラスミドの脱落が激しく、短ければ短いほど安定に保たれる事を見い出した。この結果は、F因子の分配遺伝子は、分配の際のDNAの長さによる分配阻害を補償する機能、例えばDNAを高次に折り畳む、DNA鎖を細胞内である場所からある場所へ高速で移動させるなどの機能を狙っているものと推測される。プラスミドの安定保持(分配)に、DNAの長さが関与することは、これまで報告のない新しい発見である。(2)この過程に関与する大腸菌染色体上の遺伝子を検索するため、letB遺伝子の条件致死変異体(高温及び低温感受性)を作製し、これを抑圧し得る大腸菌染色体上のサプレッサー変異株、及びハイコピーサプレッサー活性を持つ組み換えプラスミドを、分離、現在、これらの遺伝子を同定中である。

这项研究的目的和这项研究的目的是通过阐明与大肠杆菌中DNA的高阶结构（核体）构建有关的基因，从而阐明了高阶结构的分子机制。作为一种策略，在大肠杆菌F plasmide的分布过程中，Biek和Wang的报告基于F因子“分布蛋白” SOPB的“ Centromere” Incd面积，并形成了“核蛋白结构” “决定识别此过程中涉及的基因的方法。因此，我们关注我们已经分离的F因素分布SOPB突变的现象，抑制了由于质粒的长度而抑制宿主细胞的生长，并抑制了该突变。和多拷贝射剂，确定了此过程中涉及的基因，并分析了该功能。研究结果（1）如果突变在F因子分布SOPB（LETB）中具有突变，则由于质粒DNA的长度，即质粒DNA的长度，即质粒DNA（>几个10μM）塑性米I发现，质粒下降将发生。辍学越短，要保持稳定的时间越短。结果是在分布时通过DNA的长度来补偿分布抑制作用的函数，例如，DNA从DNA折叠至高阶位置的位置折叠。旨在实现它的功能。这是一个新发现，即DNA的长度与质粒的稳定维持（分布）有关。（2）为了在此过程中搜索涉及的大肠菌细菌染色体上的基因，生成了LETB基因的条件变量（高温和低温敏感性）（高温和低温度敏感性），可以抑制，可以抑制，并被抑制大肠绣球和高均值供应，并且拷贝性固体活性已经分开。