F因子DNA分配に関与する大腸菌遺伝子の検索

搜索参与 F 因子 DNA 分配的大肠杆菌基因

基本信息

批准号：
04640594
负责人：
三木健良
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04640594/
关键词：
大腸菌 F因子 DNA分配 sopB遺伝子 letB変異ペニシリン結合蛋白質 rodA遺伝子 pbpA遺伝子

项目摘要

大腸菌F因子のmini-F領域上、複製に必須な遺伝子群の左側にDNAの分離に関与すると考えられる遺伝子letA(ccdA)、letD(ccdB)、resD、右側に分配に関与すると考えられている遺伝子sopA、sopB(letB)、incDが存在する。本研究は、上記F因子遺伝子群のコードする蛋白質は、大腸菌の蛋白質、あるいは構造体と一体となって、複製の終了したF因子DNAの分離と娘細胞への分配の為の装置を構築しているものとの考えの基に、sopA、sopB(letB)遺伝子のコードする蛋白質の機能の発揮に必須な宿主大腸菌の蛋白質とその機能を明らかにするという方向から、大腸菌におけるDNA分配装置と分配過程を明らかにすることを目標としたものである。1.sopA、sopB遺伝子作用に関与する大腸菌遺伝子の同定申請者らが分離したsopB遺伝子変異letB84(am)を持つF因子は、Su^-宿主菌に導入すると宿主菌の増殖を阻害する。この増殖阻害を抑圧し得る宿主変異株(sIb変異株と命名)を分離、Tn10挿入変異との連関性より大腸菌染色体上15分にマップされる第1群、83分にマップされる第2群、55分に位置する第4群、位置未決定の残りの2群の連関群に分類することが出来た。第1群変異株についてクローン化、相補性試験を行ったところペニシリン結合蛋白質5をコードするdacA、ペニシリン結合蛋白質2をコードするpbpA、細胞の形態に関与するrodA遺伝子に変異を持つことが明かとなった。これら遺伝子は細胞の伸長と隔壁形成の調節に関与する遺伝子で、この結果はDNA分配にペプチドグリカン形成が関与する可能性を示唆するものである。2.F因子letB遺伝子変異株による増殖阻害機構の解析我々の分離したsopB遺伝子変異letB84(am)は宿主菌の増殖阻害をする。一連の欠失変異株を分離することにより、F因子上2分から44.84分の間に増殖阻害に増殖阻害遺伝子が存在することを示唆する結果を得た。現在トランスポゾン挿入変異株を分離し遺伝子の同定を行っている。

在大肠杆菌 F 因子的 mini-F 区域，复制所必需的基因组的左侧是基因 letA (ccdA)、letD (ccdB) 和 resD，它们被认为与 DNA 分离有关，并且右侧是被认为参与分配的基因 sopA、sopB(letB) 和 incD。在本研究中，基于sopA、s的想法，将F因子基因组编码的蛋白质与大肠杆菌蛋白质或结构整合，构建用于在复制到子细胞后分离和分配F因子DNA的装置。我们的目标是阐明大肠杆菌中的 DNA 分布装置和分布过程，目的是阐明宿主大肠杆菌蛋白及其对于 opB (letB) 基因编码的蛋白的功能至关重要的功能。 1.涉及sopA和sopB基因作用的大肠杆菌基因的鉴定申请人分离的具有sopB基因突变letB84(am)的F因子在导入Su^-宿主细菌中时抑制宿主细菌的生长。可以抑制这种生长抑制的分离宿主突变菌株（称为 sIb 突变体）根据其与Tn10插入突变，第四组位于55分钟，其余两组位置未定。第1组突变体的克隆和互补测试表明，它们在编码青霉素结合蛋白5的dacA、编码青霉素结合蛋白2的pbpA和参与细胞形态的rodA中发生突变。这些基因参与细胞伸长和隔膜形成的调节，这一结果表明肽聚糖的形成可能参与 DNA 分配。 2.F因子letB基因突变体生长抑制机制分析我们分离到的sopB基因突变体letB84(am)抑制宿主菌的生长。通过分离一系列缺失突变体，我们得到的结果表明，在F因子的2至44.84分钟的生长抑制期中存在生长抑制基因。我们目前正在分离转座子插入突变体并鉴定它们的基因。