FプラズミドSopB蛋白質を核とする多要素DNA蛋白質複合体の構造生物学

以 F 质粒 SopB 蛋白为中心的多组分 DNA-蛋白复合物的结构生物学

• 批准号: 09780612
• 负责人: 花井 亮
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Rikkyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780612/
• 关键词: F因子; 構造生物学; SopB; サイレンシング; Fプラズミド; 染色体分配; DNAトポロジー

F-プラズミドが宿主大腸菌細胞の分裂に際し1個づつ分配されつ機構を分子生物物理学的に理解するために、この分配機能の中心的役割を果しているSopB蛋白質を核とした多要素DNA-蛋白質複合体における構造と機能の相関を明らかにするのが、本研究の目的である。1. SopB蛋白質と相互作用する大腸菌構造の同定SopB蛋白質が内膜分画にあることを初めて明らかにした。可溶化によって、SopB蛋白質に相互作用する蛋白質を検索したところ,33kDaと140kDaのものを見出した。2. SopB蛋白質の構造と機能SopB蛋白質を多量に発現しても、結合サイトsopC近傍の遺伝子が抑制の起こらない変異体を12種単離した。変異はC末側2/3に集中していた。さらに、この中から、細胞内での局在の起こらないものを見出した。3. SopB蛋白質DNAの複合体の結晶化N末端側の欠くSopB蛋白質とDNA2重鎖21マーとの複合体の結晶化に成功した。4. SopA蛋白質とSopB蛋白質の相互作用SopA蛋白質は大量発現されるとそれ自体で染色体DNAを凝集させる作用があることを見出した。SopAのN末側がDNA結合に関与することと、SopAがSopBのC末側ドメインに結合することを見出した。5. DNAの高次構造SopB蛋白質の結合によるDNAのトポロジーの変化の理解のため、DNAのトポロジーと粘着末端構造のと関係を明らかにした。

为了理解当F-质量由宿主主划分的机制，基于SOPB蛋白的多元素DNA-蛋白质，这在此分布功能中起着核心作用。研究是为了阐明复合物中结构与功能之间的相关性。 1。首先揭示了与SOPB蛋白相互作用的大肠杆菌结构的鉴定SOPB蛋白是子宫内膜分裂。在寻找与SOPB蛋白相互作用的蛋白质后，它发现了33kDa和140kDa。 2。大量表达了SOPB蛋白和功能性SOPB蛋白的结构和功能，但未抑制结合位点附近的基因。突变集中在C 2/3的末端。此外，我发现其中没有发生在细胞中的某些东西。 3。DNA复合物的SOPB蛋白DNA结晶已成功地在N端侧和DNA2重链21 MA上丢失的SOPB蛋白结晶。 4。SOPA蛋白和SOPB蛋白的相互作用发现，大量的SOPA蛋白具有大量染色体DNA的作用。他发现SOPA的N端侧与DNA键有关，SOPA与SOPB的末端 - 侧域结合。 5。DNA拓扑结构与粘附端结构之间的关系，以了解由于DNA的高阶结构的结合而导致DNA拓扑的变化。

项目成果

R.Hanai: "On the experimental distinction between ssbsand dsbs in circular PNA" Int.J.Radiat.Biol.73・5. 475-479 (1998)

R.Hanai：“关于圆形 PNA 中 ssbs 和 dsb 之间的实验区别”Int.J.Radiat.Biol.73・5（1998）。

Hanai,R.,Yazu,M.,& Hieda,K.: "On the distincition between single-and double-strand breaks in circular DNA" International Journal of Radiation Biology. 印刷中.

Hanai, R.、Yazu, M. 和 Hieda, K.：“环状 DNA 中单链和双链断裂的区别”国际放射生物学杂志正在出版。