癌遺伝子産物・癌抑制遺伝子産物による悪性リンパ腫の放射線感受性制御機構

癌基因产物和抑癌基因产物对恶性淋巴瘤的放射敏感性控制机制

基本信息

批准号：
15025249
负责人：
大石勲
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

核内セリン・スレオニンキナーゼであるChk2は、DNA損傷に伴い活性化し、細胞周期チェックポイント制御、DNA損傷修復または細胞死の決定において重要な役割を担うと考えられている。我々はDNA損傷時にp53依存的に発現誘導される核内タンパク質ホスファターゼWip1がChk2と機能的に共役することを見出している。今回、Wip1によるChk2の制御にWip1 N末端側領域及びChk2 SQ/TQドメインが重要な役割を果たしていること、Wip1の発現を抑制することにより放射線照射に伴う細胞死が促進されること等を示し、Chk2、Wip1の関与するDNA損傷応答の分子機構の一端を明らかにした。これまでに放射線抵抗性のリンパ腫細胞株において、Chk2遺伝子の発現が顕著に減弱していることを見出している。放射線抵抗性リンパ腫細胞株におけるChk2遺伝子の発現抑制機構の解明のため、Chk2遺伝子のシークエンス解析を行ったところChk2遺伝子のORF領域に対応するexonsには変異は認められなかったが、DNAメチル化阻害剤5-azacytidine及び脱アセチル化酵素阻害剤Trichostatin AおよびSodium butylate処理によりChk2遺伝子の発現が誘導された。また、放射線抵抗性リンパ腫細胞株におけるChk2遺伝子の発現抑制機構の解明のためChipアッセイを行い、Chk2遺伝子プロモーター領域においてヒストンK9のメチル化が亢進していること、ならびにヒストンH3,H4のアセチル化のレベルが低下していることを見出した。このことかち、放射線抵抗性リンパ腫細胞株におけるChk2遺伝子の発現抑制は、Chk2遺伝子領域におけるepigenetic制御によるものと考えられた。

CHK2是一种核骨灰三辛基酶，被认为在DNA损伤中具有活性，并且在确定细胞周期检查点控制，DNA损伤修复或细胞死亡决策中起着重要作用。我们发现，p53依赖性诱导的磷酸酶WIP1（当DNA损坏时p53诱导）将与CHK2合作使用。这次，它表明WIP1 N ECASE区域和CHK2 SQ/TQ结构域在WIP1对CHK2的控制中起重要作用，并且通过抑制WIP1的表达，与辐射照射相关的细胞死亡得到了促进。揭示了CHK2和WIP1涉及的DNA损伤反应的分子机制的一部分。到目前为止，它发现CHK2基因的表达已在辐射抗性淋巴瘤细胞中显着降低。进行CHK2基因序列分析是为了阐明抗辐射淋巴瘤细胞库存中的CHK2基因表达，但在与CHK2基因相对应的外显子中没有突变，但DNA甲基化抑制作用。 5-氮杂丁胺和外部 - 乙酰化酶抑制剂trichostatin A和丁酯钠处理。此外，进行了芯片测定，以阐明CHK2基因在抗辐射淋巴瘤细胞库存中的表达抑制机制，并且已经增强了CHK2基因启动子区域中组蛋白K9的甲基化，并增强了H3，H3，H4的乙酰化。我发现水平正在下降。这被认为是由于无线电淋巴瘤细胞中CHK2基因的CHK2基因区域的表观遗传对照所致。