バクテリオファージMuを構成するサブユニットの構造解析

组成噬菌体Mu的亚基的结构分析

基本信息

批准号：
18054005
负责人：
武田茂樹
金额：
$ 4.42万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

バクテリオファージMuは多様なバクテリアに感染できる溶原性のウイルスである。大きく構造は頭部と尾部からなるが、尾部の先端には基盤と呼ばれる構造体があり、この基盤は宿主細胞を認識して結合するドッキングポートである。本研究により基盤を構成するサブユニットの1つであるgp45の精製法を確立し、その解析を行った。その結果、C末端ドメインが安定な3量体として精製でき、gp45が大腸菌の外膜タンパク質であるOmpCと複合体を形成することが明らかになった。gp45は宿主の認識や結合に関与すると考えられてきたが、この結果はMuファージのレセプターの一つがOmpCであることを示唆している。また、gp45とOmpC複合体の結晶解析が実現すればウイルスが宿主を認識する機構を分子的に理解することが可能になる。これまで精力的にgp45とOmpC複合体の結晶の作製に努力したが、gp45が凝集体を形成するため結晶化が困難であった。本研究でgp45のC末端ドメイン単独では凝集体をあまり形成しないこと、C末端ドメインだけでもOmpCとの複合体を形成することがあきらかになったので、今後はC末端ドメインとOmpCの複合体の結晶化を試みることによりウイルスの宿主認識の仕組みを原子レベルで明らかにすることを目指す予定である。さらに本研究では初めて構成するサブユニットであるgp41の精製に成功し、これが4量体を形成することを明らかにした。このgp41についても結晶化を試みている。

噬菌体MU是一种溶裂病毒，可以感染各种细菌。该结构很大，由头部和尾巴组成，但是在尾巴的尖端上有一个称为基底的结构，该结构是一个识别并结合宿主细胞的对接端口。这项研究为GP45建立了一种纯化方法，GP45是构成基础的亚基之一，并分析了基础。结果，据揭示了C末端结构域可以被纯化为稳定的三聚体，并且GP45与EMPC形成了EMPC，即大肠杆菌的外膜蛋白。尽管人们认为GP45参与宿主识别和结合，但该结果表明OMPC是MU噬菌体的受体之一。此外，将实现对GP45和OMPC复合物的晶体学分析，以使病毒识别宿主的机制有分子的理解。到目前为止，我们一直在积极地准备GP45和OMPC复合物的晶体，但是由于GP45形成聚集体，因此结晶一直很困难。在这项研究中，已经表明，单独的GP45的C端结构域并没有形成太多聚集体，并且单独的C端结构域与OMPC形成复合物，因此我们计划旨在阐明宿主在原子水平上识别病毒在原子水平上的机制，以试图在C-末端结构域之间结晶的综合体与C-termalinal domain和Oumpc之间结晶。此外，这项研究表明，gp41的纯化是第一次成分亚基，这是成功的，并且这形成了四聚体。该GP41也正在结晶。

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Gタンパク質共役受容体GPR61のN末端による恒常的活性化の検証

G蛋白偶联受体GPR61 N端组成型激活的验证

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
豊岡勝;武田茂樹
通讯作者：
武田茂樹

Structural modeling and mutation analysis of a nociceptin receptor and its ligand complexes

伤害感受素受体及其配体复合物的结构建模和突变分析

DOI：
发表时间：
期刊：
J.Biochem. (In press)
影响因子：
0
作者：
N. Akuzawa;S. Takeda;M. Ishiguro;N.Akuzawa et al.;N.Akuzawa et al.
通讯作者：
N.Akuzawa et al.

5-oxo-ETE受容体を活性化するペプチドとその誘導体

激活5-oxo-ETE受体的肽及其衍生物

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Structural modeling and mutation analysis of a nociceptin receptor and its ligand complexes.

伤害感受素受体及其配体复合物的结构建模和突变分析。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
J. Biochem. (Tokyo) 141
影响因子：
0
作者：
N. Akuzawa;S. Takeda;M. Ishiguro
通讯作者：
M. Ishiguro

バクテリオファージMu基盤サブユニットgp45の精製と解析

噬菌体 Mu 亚基 gp45 的纯化和分析

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
鈴木栄貴;武田茂樹
通讯作者：
武田茂樹

DOI：
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通讯作者：
長田裕之