バクテリオファージMuを構成するサブユニットの構造解析

组成噬菌体Mu的亚基的结构分析

基本信息

  • 批准号:
    20051004
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 4.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2008
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2008 至 2009
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Muファージの尾部基盤の分子集合・自己組織化による自律的な形態形成の過程を解明するために、基盤を構成するgp41、gp45、gp46の組み換え体蛋白質の精製と解析を行った。それぞれの蛋白質は効率よく大腸菌で発現し、容易に精製することができた。gp46は発現時に沈殿してしまう画分も見られたが、その沈殿を懸濁し500気圧で8時間放置することにより、容易に可溶化できることがわかった。それぞれの蛋白質のX線結晶解析のための結晶化を試みたが、よい結晶は得られなかった。そこでMuファージgp45とアミノ酸配列で相同性をもち、機能が同じと考えられているP2ファージのgpVについてそのC端ドメインの発現と結晶化を行ったところ、よい回折を示す結晶が得られた。その格子定数はa=71.0Å、b=67.4Å、c=72.1 α=90°Å、β=99.8°、γ=90°であった。回折像はおよそ2.1オングストロームの分解能を示した。現在、同型重原子置換体の作製を行っている。
为了阐明由于分子组装和MU噬菌体尾基础架构的自治形式形成的过程,对GP41,GP45和GP46的成就进行了,进行了和分析和分析。每种蛋白质在大肠杆菌中有效地表达,并且可以轻松完善。 GP46在表达时有一些绘画,但是发现可以通过悬挂沉积物并在500气压下将其悬挂8小时来解决。我们试图结晶以进行每种蛋白质的X射线晶体分析,但没有获得良好的晶体。因此,当Mu Farge GP45和氨基酸序列具有同源性时,执行并结晶的P2 Farge GPV(被认为是相同的功能),并获得了显示好时光的晶体。晶格常数为A =71.0Å,B =67.4Å,C =72.1α= 90°,β= 99.8°,γ= 90°。折叠的图像显示约2.1 Ongstrom分辨率。目前,我们正在生产相同类型的Shighara -gi -anti -substituent。

项目成果

期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Identification of novel peptide agonists from a random peptide library for a 5oxo-ETE receptor, a receptor for bioactive lipids
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Sasaki Y.;et.al.
  • 通讯作者:
    et.al.
Production and characterization of the recombinant human μ-opioid receptor from transgenic silkworms
转基因蚕重组人μ阿片受体的生产和表征
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    M.Tateno;et al.
  • 通讯作者:
    et al.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2008
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Toyooka M.;et.al.;武田茂樹;遠山和也他;遠山和也他
  • 通讯作者:
    遠山和也他
G protein-coupled receptors and insulin secretion ; Drug screening for type 2 diabetes
G蛋白偶联受体与胰岛素分泌;
  • DOI:
  • 发表时间:
    2010
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Toyooka M.;et.al.;武田茂樹
  • 通讯作者:
    武田茂樹
GPR119アゴニスト
GPR119激动剂
  • DOI:
  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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  • 发表时间:
    2020
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    0
  • 作者:
    河村 達郎;二村 友史;SHANG Erchang ;室井 誠;JANNING Petra ;上野 雅佳;WILKE Julian ;武田 茂樹;近藤 恭光;ZIEGLER Slava ;渡辺 信元;WALDMANN Herbert;長田 裕之;椎名瞳,尾崎綾栞,多森翔馬,野崎優香,髙澤涼子,佐々木和教,石黒斉,宮城洋平,長嶋洋治,田沼靖一,大野茂男,秋本和憲
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    2020
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  • 作者:
    河村 達郎;二村 友史;SHANG Erchang ;室井 誠;JANNING Petra ;上野 雅佳;WILKE Julian ;武田 茂樹;近藤 恭光;ZIEGLER Slava ;渡辺 信元;WALDMANN Herbert;長田 裕之
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知道了