マウス形態変異に対する修飾遺伝子のゲノム解析

小鼠形态变异修饰基因的基因组分析

基本信息

批准号：
14011250
负责人：
城石俊彦
金额：
$ 3.71万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)この1年間の大規模な連鎖解析により、修飾遺伝子の原因領域に6つの組み換えマウス系統を検出した。これらを用いた遺伝的地図と物理的地図の作製によりTs修飾遺伝子の存在する責任領域をTs遺伝子自身を含む約120Kbにマップした。さらに、BACクローンを単離して、cDNA選択法やキャンディデートアプローチ法で候補遺伝子を探索した。その結果、mDIC(dynein motor protein), DAC(kinesin-like motor protein),それに機能未知の膜タンパクをコードするTTYH2(Tweety homolog2)の合計3種類の候補遺伝子を見出した。これらの内、TTYH2において、修飾遺伝子によるTs表現型の多型と対応したアミノ酸多型が観察され、有力な候補遺伝子と考えられた。(2)B6-MSMコンソミック系統を用いた交配実験による修飾遺伝子のマッピングは、現在進行中である。Hx系統の遺伝的背景にKJR系統の遺伝子が導入されることにより、多くのホモ個体で親系統のHxではみられない前肢に限局した表現型が観察された。変異個体では手の骨が秩序だって形成されず、明らかなパターン形成の異常を示した。特に手の先端部に鬱血を伴った細胞死と思われる障害を示すものが多く、アポトーシスの異常が示唆された。これらについて胎児期での四肢形態形成に関与する遺伝子の発現解析を予定している。

(1)通过一年来的大规模连锁分析，我们在修饰基因的致病区域中检测到了6个重组小鼠品系。通过使用这些构建遗传图谱和物理图谱，我们将 Ts 修饰基因的负责区域映射到大约 120 Kb，包括 Ts 基因本身。此外，我们分离了 BAC 克隆，并使用 cDNA 选择和候选方法方法寻找候选基因。结果，他们总共发现了三个候选基因：mDIC（动力蛋白运动蛋白）、DAC（类驱动蛋白运动蛋白）和TTYH2（Tweety同源物2），它编码一种功能未知的膜蛋白。其中，在TTYH2中观察到了与修饰基因引起的Ts表型多态性相对应的氨基酸多态性，并且它被认为是强有力的候选基因。 (2)目前正在利用B6-MSM康体株通过杂交实验来绘制修饰基因。通过将 KJR 品系的基因引入 Hx 品系的遗传背景，许多纯合个体表现出局限于前肢的表型，而这在亲本 Hx 品系中未见。在突变个体中，手骨的形成不是有序的，并且在图案形成上表现出明显的异常。特别是，有许多病例出现细胞死亡并伴有手尖充血的病变，表明细胞凋亡异常。我们计划分析胎儿时期参与肢体形态发生的基因的表达。