ヒト癌退縮抗原 SART-1 分子の解析

人类癌症消退抗原SART-1分子分析

基本信息

批准号：
09255261
负责人：
七條茂樹
金额：
$ 2.43万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

食道癌患者の末梢血から自家癌特異的cytotoxic T-cell(CTL)を増やすことに成功し、このCTLが認識する抗原ペプチドをコードする遺伝子、squamous cell carcinoma antigen recognized by T-cell 1(SART-1、GenBank accession number: AB006198)をgene-expression cloning法(Boon T et al)により得た。この遺伝子は、正常細胞も含めて調べた限り全ての細胞で、2.6kbの長さのmRNAとして発現し、核移行シグナル、ロイシンジッパー・モチーフを持つ800アミノ酸残基からなるタンパク質をコードしていることが示唆された。ウエスタンブロットで解析したところ、このタンパク質は正常非増殖性細胞では検出されないが、精巣、胎児肝臓、および増殖細胞(正常細胞も含む)に発現していた。また、DNA結合能を有する核内タンパクで、細胞周期依存性(M期で主に発現)が認められた。一方、扁平上皮癌や腺癌では、43kdのタンパク質も同時に翻訳され(bicistronic gene)、これが癌抗原になっている事が示唆された。また、胎児肝や精巣以外の正常細胞や組織では発現せず、また腫瘍の中でも白血病細胞、メラノーマでは検出できなかった。HLA-A2601拘束性に認識されるペプチド抗原は、KGSGKMKTEであることが示唆され、さらにこのペプチドを用いて、in vitroで自家癌特異的CTLが誘導できた。しかし、このペプチドをワクチンとして用いることができるかどうかは、動物実験での有害事象の検討、in vivoでのCTLの誘導実験、アジュバントの種類、投与量、投与方法など、多くの検討を要する。

我们成功地从食道癌患者的外周血中增加了自体癌症特异性细胞毒性T细胞（CTL），并鉴定了T细胞识别的鳞状细胞癌抗原1（SART-），这是一种编码这些抗原肽的基因。 CTLs.1，GenBank登录号：AB006198)通过基因表达克隆方法获得(Boon T等人)。该基因在所有检查的细胞（包括正常细胞）中表达为 2.6 kb mRNA，并编码由 800 个氨基酸残基组成的蛋白质，具有核输出信号和亮氨酸拉链基序。通过Western blot分析，在正常非增殖细胞中未检测到该蛋白，但在睾丸、胎儿肝脏和增殖细胞（包括正常细胞）中表达。此外，它是一种具有DNA结合能力的核蛋白，并且观察到细胞周期依赖性（主要表达于M期）。另一方面，在鳞状细胞癌和腺癌中，也翻译了43kd蛋白（双顺反子基因），表明该蛋白充当癌抗原。此外，它在胎儿肝脏和睾丸以外的正常细胞或组织中不表达，并且在肿瘤细胞中的白血病细胞或黑色素瘤中未检测到。 HLA-A2601限制性识别的肽抗原被认为是KGSGKMKTE，此外，使用该肽，可以在体外诱导自体癌症特异性CTL。然而，这种肽是否可以用作疫苗需要很多考虑，包括动物实验中的不良事件、体内CTL诱导实验以及佐剂的类型、剂量和给药方法等。