Development of novel cancer immunotheray by combining regulatory T-cell elimination and TGF-b inhibitors

通过结合调节性 T 细胞消除和 TGF-b 抑制剂开发新型癌症免疫疗法

• 批准号: 21K07203
• 负责人: 鈴木 進
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07203/
• 关键词: TGF-β; CCR4; 制御性T細胞; 細胞傷害性T細胞; モガムリズマブ; トラメチニブ; MEK; ADCC; CTL; Treg; M2マクロファージ; CAF; TGF-b; RNAscope; regulatory T-cell; immunotherapy; cytotoxic T-cell

初年度の研究で、細胞傷害性T細胞(CTL)の機能(細胞傷害,増殖,サイトカイン産生)が、TGFβ1,β3によって直接抑制されること、またTGFβR1阻害剤(SB525334)が、CTLの機能を回復させることから、TGFbリッチな腫瘍局所において、TGFbを阻害することはがん治療において効果的と考えれた。しかしながら、TGFβ存在下に抗原刺激を受けることにとって、CTL上にCCR4が強く発現することが明らかとなった。このことから抗CCR4抗体(モガムリズマブ)が制御性T細胞(Treg)除去の際、CTLも除去してしてしまう可能性が高いと思われた。今年度においては、CTL上のCCR4発現を抑制しつつ、CTLの抗腫瘍効果は減弱させない薬剤について検討した。サイトメガロウイルス(CMV)pp65抗原を疑似がん抗原として発現させた口腔癌由来細胞株HSC-3(HSC-3pp65)とpp65-CTLを様々な阻害剤及びTGFβ1存在下に共培養し、CTLの機能及びCCR4の発現を解析した。SB525334はCTL上CCR4の発現を抑制するが、部分的であり、CTLがモガムリズマブを介した抗体依存性細胞傷害(ADCC)を部分的に受けることが明らかとなった。そこで、TGFβ下流非古典的経路上分子(MEK,PI3K等)に対する阻害剤を試したところ、MEK阻害剤であるトラメチニブがCCR4の発現をほぼ抑制することが見いだされた。一方、Treg上のCCR4発現は抑制しなかった。MEK経路は、T細胞受容体下流に位置することから、トラメチニブは、T細胞機能も同時に抑制される傾向にあったが、サイトカイン産生を除いては、細胞増殖、細胞傷害に対しては軽微であった。モガムリズマブとトラメチニブの2剤併用は、Tregの除去効果を保ちつつ、活性化CTLへの影響を最小化でき、より効果的なTreg標的療法となる可能性がある。

在第一年的研究中，我们发现细胞毒性T细胞（CTL）功能（细胞毒性、增殖、细胞因子产生）被TGFβ1和β3直接抑制，并且TGFβR1抑制剂（SB525334）抑制CTL功能，这表明抑制TGFb。富含 TGFb 的肿瘤区域对癌症治疗有效。然而，已经清楚的是，在 TGFβ 存在的情况下，当抗原刺激时，CCR4 在 CTL 上强烈表达。由此看来，抗 CCR4 抗体（mogamulizumab）在去除调节性 T 细胞（Treg）时也可能去除 CTL。今年，我们研究了抑制 CTL 上 CCR4 表达但不降低 CTL 抗肿瘤作用的药物。将表达巨细胞病毒 (CMV) pp65 抗原作为假癌抗原的口腔癌衍生细胞系 HSC-3 (HSC-3pp65) 和 pp65-CTL 在各种抑制剂和 TGFβ1 存在下共培养。分析了CCR4。结果表明，SB525334 抑制了 CTL 上 CCR4 的表达，但只是部分抑制，并且 CTL 部分受到 mogamulizumab 介导的抗体依赖性细胞毒性 (ADCC)。因此，当我们尝试针对TGFβ非经典途径下游分子（MEK、PI3K等）的抑制剂时，我们发现MEK抑制剂曲美替尼几乎抑制了CCR4的表达。另一方面，Treg 上的 CCR4 表达并未受到抑制。由于MEK通路位于T细胞受体的下游，曲美替尼往往会同时抑制T细胞功能，但除了细胞因子的产生外，对细胞增殖或细胞毒性影响不大。 mogamulizumab和曲美替尼的两药组合可以最大限度地减少对活化CTL的影响，同时保持Treg去除效果，可能是一种更有效的Treg靶向治疗。

项目成果

Transforming growth factor-β inhibitor is a candidate drug for immunotherapy of oral squamous cell carcinoma

转化生长因子-β抑制剂是口腔鳞癌免疫治疗的候选药物

• 发表时间: 2021
• 作者: Kondo Y;Suzuki S;Takahara T;Ono S;Goto M;Miyabe S;Sugita Y;Ogawa T;Ito H;Satou A;Tsuzuki T;Yoshikawa K;Ueda R;Nagao T.
• 通讯作者: Nagao T.

Trametinib improves Treg selectivity of anti-CCR4 mAb by regulating CCR4 expression in CTLs induced via TCR/TGF-β signaling

Trametinib 通过调节 TCR/TGF-β 信号传导诱导的 CTL 中的 CCR4 表达来提高抗 CCR4 mAb 的 Treg 选择性

• 发表时间: 2022
• 作者: Ono S;Suzuki S;Kondo Y;Okubo I;Goto M;Ogawa T;Kato H;Ito H;Takahara T;Satou A;Tsuzuki T;Yoshikawa K;Nagao T;Ueda R.
• 通讯作者: Ueda R.