がん遺伝子とがん抑制遺伝子の相互作用による細胞の増殖・分化の調節

通过癌基因和抑癌基因之间的相互作用调节细胞增殖和分化

基本信息

批准号：
08265245
负责人：
富永明
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kochi Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265245/
关键词：
がん遺伝子がん抑制遺伝子 goosecoid遺伝子 PU.1 ets 赤芽球分化 SCL

项目摘要

Goosecoid遺伝子はアフリカツメガエルの原口背唇部に発現され,Spemannのオルガナイザーとして働くホメオボックス遺伝子である。この遺伝子はアクチビンにより誘導されることが知られておりdorsalizing(背側化)効果を持つ。アクチビンにより赤血球に分化する赤芽球系細胞F5にGoosecoid遺伝子(gsc)を発現させると分化を抑制することを見い出した。本研究はこの細胞F5-gsc74-3を用いてgscがどのようなメカニズムで分化を抑制し増殖を誘導するのかを明らかにすることを目的としている。1.この系でgoosecoidタンパク質(GSC)と結合するタンパク質としてがん遺伝子etsファミリーPU.1を免疫沈降法で検出した。2.etsファミリーのfli-1,ets-2,PU.1をin vitroの転写・翻訳系を用いて合成し、GSC-ビーズへの結合を検討したところ、PU.1だけが特異的な結合を示した。in vivoでもアクチビン刺激とともに減少し、GSC結合性の分子量約4万の分子はPU.1であることを再沈降法で確認した。3.さらに、F5-gsc-74-3にマウスPU.1遺伝子をハイグロマイシン耐性を発現するベクターに挿入して移入することによりアクチビン刺激によるヘモグロビン合成が回復することを見い出した。4.GSCと結合するタンパク質を沈降反応で検出し、さらに免疫沈降法でPU.1だけでなく抑制性がん遺伝子タンパク質Rbを検出した。5.in vitroの転写・翻訳系を用いて合成したGSCは血液の発生・分化に必須である転写因子SCLと結合しなかった。

粘体基因是一种同型基因基因，在爪诺邦的背嘴唇上表达，并充当Spemann的组织者。该基因已被激活素诱导并具有背层作用。发现在红细胞细胞F5中表达鹅体基因（GSC），该基因细胞F5通过激活素区分成红细胞，抑制分化。这项研究旨在阐明GSC抑制分化并使用该细胞F5-GSC74-3诱导扩散的机制。 1。在该系统中，通过免疫沉淀作为一种与粘体蛋白（GSC）结合的蛋白质检测到癌基因ETS家族PU.1。 2。使用体外转录和翻译系统合成FLI-1，ETS-2和PU.1的ETS家族，研究与GSC珠的结合时，只有PU.1显示出特定的结合。通过重新沉淀证实，通过激活素刺激在体内降低了分子量约40,000 GSC结合的分子，并且分子量约为40,000的分子是PU.1。 3.此外，发现通过将小鼠pu.1基因插入表达杂菌抗性的载体并将其转移到F5-GSC-74-3的载体中，通过将小鼠pu.1基因插入小鼠PU.1基因来恢复血红蛋白合成。 4。通过降水反应检测到与GSC结合的蛋白质，除PU.1外，通过免疫沉淀检测到抑制性癌症基因蛋白RB。 5。使用体外转录和翻译系统合成的GSC与SCL没有结合，SCL是对血液发育和分化至关重要的转录因子。