急性前骨髄球性白血病の発症及び寛解機構の解析

急性早幼粒细胞白血病发病及缓解机制分析

基本信息

批准号：
06266207
负责人：
垣塚彰
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.PML遺伝子の機能解析抗体染色法により,PML蛋白質が、APL細胞の核内でPML-RAR蛋白質と複合体を形成していること、さらに、すべての細胞の核において極めて特徴的な粟粒状の染色像を示すことを明らかにし、この核内の領域をPOD(PML oncogenic domain)と名付けた。PODは、非APL細胞では、直径約0.3μmで約20箇所存在するのに対し、APL細胞では、無数のさらに細かいPODが存在していた。しかもAPL細胞のPODは、RAに反応してその数と大きさが正常細胞型に近づいていくとこが判明した。さらにこの過程でPML-RAR蛋白質が、RA依存性に分解されて、核より消失していくことが明らかになった。我々の解析結果より、PML-RAR蛋白質が、PML蛋白質と複合体を形成し正常なPODを破壊する事によってPODの機能を阻害してること、PML-RAR蛋白質が、RA投与によって分解されて核より消失していくことがAPLの発症及び寛解の分子機構であることが明らかになった。2.RAR遺伝子の機能解析APL細胞のRAによる分化機構をさらに理解するためには、レチノイドの生体における生理作用を明らかにする必要がある。我々は、レチノイン酸受容体(RAR)が、細胞内受容体スーパーファミリーに属し甲状腺ホルモン受容体(TR)と最も近縁な関係にあることにヒントを得て、常染色体優性遺伝形式をとる甲状腺ホルモン不応症に同定さたドミナント・ネガティブな作用を示すアミノ酸変異を構造的に近縁なRARに導入することによりドミナント・ネガティブRARを作出することに成功した。つづいて、このドミナント・ネガティブRARを用い、皮膚を標的臓器としたトランスジェニック・マウスを作成したところ、得られたマウスの皮膚には皺および体毛がなく、微視的には角化細胞及び有棘細胞が激減しており、いずれも未成熟な皮膚の特徴を示していた。以上の結果は、正常な皮膚の発生にRAの作用が不可欠であることを初めて実験的にも示したものである。今後、本方法を他の組織に適応することにより、組織ごとにRAの生理活性を明らかにしていきたい。さらにドミナント・ネガティブRARとPML-RARの機能をトランスジェニック・マウスを用いて比較検討することにより、APL細胞の分化の停止がRARの機能異常により引き起こされている可能性をあわせて検証していく。

1。对PML基因的功能分析：抗体染色表明，PML蛋白与APL细胞核中PML-RAR蛋白形成复合物，并且它们在所有细胞的细胞核中表现出极为独特的乳染色图像，并且该核中的区域命名为POD（PML致癌域）。豆荚存在于非APL细胞中，直径约为0.3μm，而在APL细胞中，也存在无数较细的豆荚。此外，发现APL细胞中POD的数量和大小响应RA接近正常细胞类型。此外，揭示了PML-RAR蛋白以RA依赖性方式降解并在此过程中从细胞核中消失。我们的分析表明，PML-RAR蛋白与PML蛋白形成复合物并破坏正常豆荚，并且PML-RAR蛋白通过RA给药降解并从细胞核中消失，这是APL发育和缓解的分子机制。 2。对RAR基因的功能分析，以进一步了解RA的APL细胞的分化机制，有必要阐明类维生素类动物在生物体中的生理影响。我们受到了这一事实的启发：视黄酸受体（RARS）属于细胞内受体超家族，与甲状腺激素受体（TRS）最密切相关，并且通过引入氨基酸突变，这些氨基酸突变在表现出巨大的自身抗性的胰岛反应形式中，成功地创建了占主导地位的氨基酸突变，从而成功地产生了占主导地位的RAR。抢。接下来，当使用这种显性负rar进行转基因小鼠时，将皮肤用作靶器官。由此产生的小鼠没有皱纹或头发，角色细胞和鳞状细胞的数量被显微镜减少，这两者都显示出未成熟皮肤的特征。以上结果是在实验上首次证明RA的作用对于正常皮肤发育至关重要。将来，我们希望通过将此方法适应其他组织来阐明每种组织的RA的生理活性。此外，通过使用转基因小鼠比较和检查显性负RAR和PML-RAR的功能，我们还将研究APL细胞分化停滞是由RAR功能障碍引起的可能性。