細胞複製を制御する遺伝子とMAPキナーゼの相互作用

控制细胞复制的基因和 MAP 激酶之间的相互作用

基本信息

批准号：
06247208
负责人：
後藤由季子
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06247208/
关键词：
MAPキナーゼ細胞周期 cdc2 MAPKK

项目摘要

まず、細胞周期の中心的な制御因子であるMPF(cdc2/サイクリン)とMAPキナーゼの関連を検討した。アフリカツメガエル未成熟卵に、精製したMPFをインジェクトすると内在性MAPキナーゼが活性化するが、プロゲステロン刺激によるMPFの活性化はMAPKKの中和抗体で抑えられる。さらに、恒常的活性型MAPKKを未成熟卵にインジェクトするとそれだけでMPFの活性化が起こった。また、MAPキナーゼの活性化を、MAPキナーゼフォスファターゼであるCL100をインジェクトすることによって抑制すると、プロゲステロン刺激によるMPFの活性化が有為に抑えられた。以上のことは、MPFとMAPキナーゼの活性化が、アフリカツメガエルの卵成熟においては、相互に依存していることを示唆している。次に、哺乳類培養細胞のM期において、MAPキナーゼが関与する可能性を検討した。活性型MAPキナーゼに対して特異的に反応する抗体を作製し、M期の培養細胞を染色したところ、活性型MAPキナーゼはG2期からM期前期には中心体に一部局在し、M期中期から後期にかけて紡錘体に局在した。このことは、M期において、MAPキナーゼがMPFの活性制御と機能、特に紡錘体形成に何らかの関与をしている可能性を示唆していると思われる。

首先，我们研究了细胞周期的中央调节因子MPF（CDC2/cyclin）与MAP激酶之间的关系。将纯化的 MPF 注射到未成熟的非洲爪蟾卵中会激活内源性 MAP 激酶，但孕酮刺激的 MPF 激活会被 MAPKK 中和抗体抑制。此外，仅将组成型活性 MAPKK 注射到未成熟卵中即可引起 MPF 的激活。此外，当通过注射 CL100（一种 MAP 激酶磷酸酶）抑制 MAP 激酶激活时，黄体酮刺激的 MPF 激活被显着抑制。这些发现表明，MPF 和 MAP 激酶激活在非洲爪蟾卵母细胞成熟过程中是相互依赖的。接下来，我们研究了 MAP 激酶参与培养的哺乳动物细胞 M 期的可能性。当我们制备了与活化的 MAP 激酶特异性反应的抗体并对 M 期培养的细胞进行染色时，我们发现活化的 MAP 激酶从 G2 到早期 M 期部分定位于中心体，而在 M 期则定位于纺锤体。从中期到后期。这表明 MAP 激酶可能参与 M 期 MPF 活性和功能的调节，特别是纺锤体的形成。