細胞複製を制御する遺伝子とMAPキナーゼの相互作用

控制细胞复制的基因和 MAP 激酶之间的相互作用

• 批准号: 06247208
• 负责人: 後藤 由季子
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06247208/
• 关键词: MAPキナーゼ; 細胞周期; cdc2; MAPKK

まず、細胞周期の中心的な制御因子であるMPF(cdc2/サイクリン)とMAPキナーゼの関連を検討した。アフリカツメガエル未成熟卵に、精製したMPFをインジェクトすると内在性MAPキナーゼが活性化するが、プロゲステロン刺激によるMPFの活性化はMAPKKの中和抗体で抑えられる。さらに、恒常的活性型MAPKKを未成熟卵にインジェクトするとそれだけでMPFの活性化が起こった。また、MAPキナーゼの活性化を、MAPキナーゼフォスファターゼであるCL100をインジェクトすることによって抑制すると、プロゲステロン刺激によるMPFの活性化が有為に抑えられた。以上のことは、MPFとMAPキナーゼの活性化が、アフリカツメガエルの卵成熟においては、相互に依存していることを示唆している。次に、哺乳類培養細胞のM期において、MAPキナーゼが関与する可能性を検討した。活性型MAPキナーゼに対して特異的に反応する抗体を作製し、M期の培養細胞を染色したところ、活性型MAPキナーゼはG2期からM期前期には中心体に一部局在し、M期中期から後期にかけて紡錘体に局在した。このことは、M期において、MAPキナーゼがMPFの活性制御と機能、特に紡錘体形成に何らかの関与をしている可能性を示唆していると思われる。

首先，我们研究了细胞周期的中央调节剂MPF（CDC2/Cyclin）与MAP激酶之间的关联。将纯化的MPF注射到未成熟的爪蟾卵中激活内源性MAP激酶，但是通过中和MAPKK中和抗体，通过孕酮刺激激活MPF。此外，仅将组成性活跃的MAPKK注射到未成熟的卵中导致MPF的激活。此外，当注射CL100（一种MAP激酶磷酸酶）抑制MAP激酶激活时，孕酮的MPF激活被有效抑制。这些结果表明，MPF和MAP激酶的激活在异爪蟾卵成熟中相互依赖。接下来，我们研究了MAP激酶可能参与哺乳动物培养细胞的M期的可能性。制备了特异性地与活性MAP激酶反应的抗体，并对M期培养的细胞进行染色。活性图激酶部分位于从G2到M早期的中心体，并从M中期到晚期定位于纺锤体。这似乎表明MAP激酶可能参与M期MPF活性，尤其是纺锤体形成的调节和功能。