MAPキナーゼの作用機序

MAP激酶的作用机制

基本信息

批准号：
11139214
负责人：
後藤由季子
金额：
$ 4.8万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11139214/
关键词：
MAPキナーゼ細胞生存アポトーシスカスペース p38 JNK MST1 PI3キナーゼ

项目摘要

我々は、MAPキナーゼ経路が細胞の生存促進に貢献している可能性を検討した。モデル系として小脳顆粒細胞を用い、チロシンキナーゼタイプの受容体に始まる生存シグナル伝達の例としてBDNF刺激を用い、また細胞内Ca^<++>濃度の上昇による生存シグナル伝達の例として脱分極刺激を用い、MAPキナーゼ経路の貢献の有無を検討した。BDNFを小脳顆粒細胞に加えるとMAPキナーゼの活性化とPI3キナーゼの下流の分子AKTの活性化を誘導した。MAPキナーゼの活性化をMAPKKの阻害剤PD98059で抑制すると、BDNFによる生存促進効果を部分的に阻害した。また、MAPキナーゼ経路とPI3キナーゼ経路は相乗的に小脳顆粒細胞の生存を促進した。MAPキナーゼの活性化を抑制すると、BDNFだけでなく、高濃度KClによる脱分極刺激による生存促進効果も部分的に阻害されたので、MAPキナーゼは、チロシンリン酸化にはじまる生存シグナル伝達だけでなく、脱分極/Ca^<++>流入にはじまる生存シグナル伝達にも重要な役割を果たすと考えられる。一方、MAPキナーゼスーパーファミリーのメンバーであるJNK、p38についても、未だにその機能について不明な点が多い。我々はJNK、p38の活性を制御する分子のうちMST1に注目し、その機能を検討している。MST1は酵母STE20(MAPKKKK)の哺乳類ホモログであり、MKK4/MKK7→JNKとMKK3/MKK6→p38の経路を活性化することを我々は明らかにしてきた。MST1はFasなどのアポトーシス誘導刺激により、カスペースによって切断を受けて活性化する。そこで、本年度はMST1がアポトーシス誘導に関して何らかの役割を果たしているかを検討した。MST1は細胞に発現すると細胞膜のblebbingや核の凝縮を引き起こし、アポトーシス様の形態変化を引き起こす。MST1はDNAのヌクレオソーム単位の断片化を引き起こすが、これはカスペースの活性化を介していることが明らかになった。一方、核の凝縮と細胞膜のblebbingはカスペース活性を抑制しても誘導された。従って、MST1はカスペース依存的・非依存的両方の経路を介して細胞死を誘導することが示唆された。

我们研究了 MAP 激酶途径有助于促进细胞存活的可能性。以小脑颗粒细胞为模型系统，以BDNF刺激作为酪氨酸激酶型受体引发的生存信号转导的例子，以去极化刺激作为由于细胞内Ca^<++增加而导致的生存信号转导的例子> 浓度。我们用它来检查 MAP 激酶途径的贡献。向小脑颗粒细胞添加 BDNF 会诱导 MAP 激酶和 AKT（PI3 激酶的下游分子）的激活。用 MAPKK 抑制剂 PD98059 抑制 MAP 激酶活化可部分阻断 BDNF 的生存促进作用。此外，MAP激酶途径和PI3激酶途径协同促进小脑颗粒细胞的存活。抑制MAP激酶的活化不仅可以部分抑制BDNF，还可以部分抑制高浓度KCl去极化刺激的生存促进作用，也被认为在以去极化/Ca^<+开始的生存信号转导中发挥着重要作用。 +> 涌入。另一方面，作为MAP激酶超家族成员的JNK和p38的功能仍然存在许多未知数。我们重点关注 MST1（调节 JNK 和 p38 活性的分子之一）并研究其功能。我们已经证明，MST1 是酵母 STE20 (MAPKKKK) 的哺乳动物同源物，并激活 MKK4/MKK7→JNK 和 MKK3/MKK6→p38 途径。 MST1 被半胱天冬酶裂解并被 Fas 等凋亡诱导刺激激活。因此，今年我们研究了MST1是否在诱导细胞凋亡中发挥作用。当在细胞中表达时，MST1 会引起细胞膜起泡和核浓缩，从而导致细胞凋亡样形态变化。 MST1 导致 DNA 核小体断裂，这被发现是由 caspase 激活介导的。另一方面，即使半胱天冬酶活性受到抑制，也会诱导核浓缩和细胞膜起泡。因此，有人认为MST1通过caspase依赖性和caspase非依赖性途径诱导细胞死亡。