前庭神経核細胞の自動能におけるプロテインキナ-ゼCの役割に関する電気生理学的研究

蛋白激酶C对前庭核细胞自动能力作用的电生理研究

• 批准号: 01641520
• 负责人: 笹 征史
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01641520/
• 关键词: 前庭神経内側核ニュ-ロン; プロティンキン-ゼC; ホルボルエステル; 自発発火; カルシウムチャンネル

延髄スライス標本において、前庭神経内側核ニュ-ロンは規則正しい自発発火を示すことから、自動能があるように考えられる。本研究ではこの自発発火において、細胞内のプロティンキナ-ゼCがどのような役割を演じているかについて電気生理学的研究を行った。ラット延髄スライス標本において、細胞外に記録した前庭神経内側核ニュ-ロンの自発発火数およびリズムは、水槽内に投与したプロティンキナ-ゼCを活性化するホルボルエステルによって影響を受けなかった。一方、酵素処理により単離した前庭神経内核ニュ-ロンについて、ホ-ルセル記録を行ったところ、静止膜電位が-60〜75mVにおいて、やはり規則的な自発発火がえられた。このような状態下で、外液にGABAを作用させると膜電位依存性の外向き電流がえられ、かつGABAの作用はビククリンより遮断された。従って、このようにして単離されたニュ-ロンは膜興奮性とGABA受容体機能が保持されていると考えられた。外液にホルボルエステルを投与すると自発発火リズムが乱れ群発発火がおこり、この発火につづいて過分極がおこった。次に、テトロドトキシンおよびTEAを外液に投与してナトリウムおよびカリウムチャネルをブロックしておき、さらに記録電極内にEDTAを入れ、この単離ニュ-ロンからホ-ルセル記録を行った。このような条件下で、細胞内へ脱分極パルスを与えた時にえられるカルシウム電流について検討した。この電流は外液に加えたホルボルエステルにより増大した。洗滌後はもとのレベルまでに回復した。これらのことから、プロティンキナ-ゼCの活性化により、カルシウムチャンネルが開口され、カルシウムの流入と共に自発発火が亢進し、次いでCa^<++>活性性カリウムチャンネルが開口して過分極による興奮抑制がおこると考えられる。

在髓质切片标本中，内侧前庭核神经元表现出规则的自发性射击，被认为是自动化的。在这项研究中，我们对蛋白激酶C在这种自发性发射中的作用进行了电生理研究。在大鼠髓质切片标本中，记录的内侧前庭核的自发性射击计数和节奏不受激活水族馆中施用的蛋白激酶C的孔子的影响。另一方面，当通过酶促处理分离的前庭室内神经元进行家庭记录时，静息膜电位为-60至75 mV，并且还实现了自发的射击。在这种情况下，当将GABA应用于外部流体时，产生了依赖膜电位的外部电流，并且GABA的作用被阻断了bicucurin。因此，以这种方式分离的神经元被认为保留了膜兴奋性和GABA受体功能。当对外部流体施用Folborester时，自发点火节奏被破坏，并在簇中发生点火，从而导致超极化。接下来，将四毒素和茶施用到外部溶液中以阻断钠和钾通道，并将EDTA放置在记录电极中，并从分离的神经元中进行激素记录。在这些条件下，检查将去极化脉冲应用于细胞时获得的钙电流。该电流由福托斯堡增加到外部液体。洗涤后，他恢复到了原始水平。从这些结果中可以认为，蛋白激酶C的激活打开了钙通道，钙通道会增加自发性发射，随着钙的涌入，然后Ca^<++>主动钾通道开放，从而导致超极化抑制激发。

项目成果

H.Ujihara,A.Akaike,M.Sasa and S.Takaori: "Muscarinic regulation of spontaneously active medial vestibular neurons in vitro" Neuroscience Letters. 106. 205-210 (1989)

H.Ujihara、A.Akaike、M.Sasa 和 S.Takaori：“体外自发活动的内侧前庭神经元的毒蕈碱调节”神经科学快报。

J.Nakamura,M.Sasa and S.Takaori: "Ethanol potentiates the effect of gamma-aminobutyric acid on medial vestibular nucleus neurons responding to horizontal rotation" Life Sciences. 45. 971-978 (1989)

J.Nakamura、M.Sasa 和 S.Takaori：“乙醇增强了γ-氨基丁酸对水平旋转反应的内侧前庭核神经元的作用”生命科学。

A.Akaike,Y.Mine,M.Sasa and S.Talaori: "A patch-clamp study on muscarinic excitation of the rat adrenal chromaffin cells" J.pharmacol.exp.Ther.

A.Akaike、Y.Mine、M.Sasa 和 S.Talaori：“大鼠肾上腺嗜铬细胞毒蕈碱兴奋的膜片钳研究”J.pharmacol.exp.Ther。

A.Akaike,Y.Mine,M.Sasa and S.Takaori: "Voltage-and current-clamp on muscarinic and nicotinic excitation of the rat adrenal chromaffin cells" J.Pharmcol.exp.Ther.

A.Akaike、Y.Mine、M.Sasa 和 S.Takaori：“大鼠肾上腺嗜铬细胞毒蕈碱和烟碱激发的电压和电流钳” J.Pharmcol.exp.Ther。

M.Hara,M.Sasa and S.Takaori: "Ventral tegmental area-mediated inhibition of neurons of the nucleus accumbens receiving input from the parafascicular nucleus of the thalamus is mediated by dopamine D_1 receptors" Neuropharmacology. 28. 1203-1209 (1989)

M.Hara、M.Sasa 和 S.Takaori：“腹侧被盖区介导的伏隔核神经元接收来自丘脑束旁核的输入的抑制是由多巴胺 D_1 受体介导的”神经药理学。