間葉系幹細胞エクソソームによる創傷治癒・抗炎症作用メカニズムの解析

间充质干细胞外泌体促进伤口愈合及抗炎作用机制分析

• 批准号: 22H03273
• 负责人: 岩田 隆紀
• 金额: $ 10.9万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H03273/
• 关键词: エクソソーム; 間葉系幹細胞; 創傷治癒作用; 抗炎症作用; 再生医療

細胞を用いた再生医療においては細胞本体だけでなく、細胞の分泌する様々な物質によるパラクライン効果が重要な役割を果たしており、特にエクソソームが近年注目されている。エクソソームは細胞が分泌する直径50-150 nm程度の膜小胞で、内部にはタンパク・脂質・核酸などの様々な生物活性分子を有している。サイズが小さいため静脈投与しても塞栓症のリスクが少なく、また生きた細胞と違い冷凍保存可能であるため管理も容易であり、次世代の“cell free療法”として臨床応用が進められている。そこで本研究では間葉系幹細胞由来のエクソソーム抽出技術を最適化するとともに、エクソソーム内に包含されているmRNAやmiRNAを解析し、とくに創傷治癒や抗炎症作用にとって重要な因子の同定を目指す。今年度においては、間葉系幹細胞からエクソソームを単離し、エクソソームの重要マーカーであるテトラスパニンの確認を行い、サイズエクスクルージョンによるエクソソームの単離方法を最適化した。また、間葉系幹細胞の大量培養におけるエクソソームの単離方法の検討を行った。今後は、再現性の高さおよびダイナミックレンジの広さからマイクロアレイにて網羅解析を実施し、miRNAのプロファイリングを行う予定である。また、既存の次世代シークエンサーの結果とmiRNAのプロファイリングから行ったターゲット予測解析を行うことで、miRNAの絞り込みを行い、創傷治癒や抗炎症作用にとって重要な因子の同定に繋げていく予定である。

在利用细胞的再生医学中，不仅细胞本身，细胞分泌的各种物质的旁分泌作用也发挥着重要作用，外泌体近年来受到特别关注。外泌体是由细胞分泌的直径约50-150 nm的膜囊泡，含有蛋白质、脂质、核酸等多种生物活性分子。由于体积小，即使静脉注射，栓塞的风险也很小，而且与活细胞不同，它们可以冷冻保存，易于管理，作为下一代“无细胞疗法”的临床应用正在取得进展.因此，在本研究中，我们将优化间充质干细胞来源的外泌体的提取技术，分析外泌体中包含的mRNA和miRNA，旨在找出对伤口愈合和抗炎作用特别重要的因子。今年，我们从间充质干细胞中分离出了外泌体，证实了外泌体的重要标志物四跨膜蛋白的存在，并利用尺寸排除优化了外泌体分离方法。我们还研究了在间充质干细胞大量培养中分离外泌体的方法。未来，我们计划使用微阵列进行全面分析，因为它们具有高重现性和宽动态范围，并对 miRNA 进行分析。此外，通过基于现有的下一代测序仪结果和 miRNA 分析进行靶点预测分析，我们计划缩小 miRNA 的范围，并确定对伤口愈合和抗炎作用重要的因素。

项目成果

High‐frequency pulsed diode laser irradiation inhibits bone resorption in mice with ligature‐induced periodontitis

高频脉冲二极管激光照射抑制结扎引起的牙周炎小鼠的骨吸收

• DOI: 10.1111/jcpe.13695
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Clinical Periodontology
• 影响因子: 6.7
• 作者: Ohsugi Yujin;Hatasa Masahiro;Katagiri Sayaka;Hirota Tomomitsu;Shimohira Tsuyoshi;Shiba Takahiko;Komatsu Keiji;Tsuchiya Yosuke;Fukuba Shunsuke;Lin Peiya;Toyoshima Keita;Maekawa Shogo;Niimi Hiromi;Iwata Takanori;Aoki Akira
• 通讯作者: Aoki Akira

Treatment of Peri-implantitis Caused by Malpositioning and an Extra Implant: A Case Report

错位和额外种植体引起的种植体周围炎的治疗：病例报告

• DOI: 10.11607/prd.4800
• 发表时间: 2022
• 期刊: The International Journal of Periodontics & Restorative Dentistry
• 作者: Shiba Takahiko;Katagiri Sayaka;Komatsu Keiji;Nemoto Takashi;Takeuchi Yasuo;Chen Bo;Zhou Yongsheng;Iwata Takanori
• 通讯作者: Iwata Takanori

Novel flapless esthetic procedure for the elimination of extended gingival metal tattoos adjacent to prosthetic teeth: Er:YAG laser micro-keyhole surgery

用于消除假牙附近延伸的牙龈金属纹身的新型无翻瓣美容手术：Er:YAG 激光微锁孔手术

• DOI: 10.2186/jpr.jpr_d_21_00045
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Prosthodontic Research
• 影响因子: 3.6
• 作者: Mizutani Koji;Mikami Risako;Tsukui Akira;Nagai Shigeyuki;Pavlic Verica;Komada Wataru;Iwata Takanori;Aoki Akira
• 通讯作者: Aoki Akira

Independent Roles of Molecular Mobility and Zeta Potential on Supramolecular Surfaces in the Sequence of RAW264.7 Macrophage Responses

• DOI: 10.1002/mabi.202200282
• 发表时间: 2022-09-09
• 期刊: MACROMOLECULAR BIOSCIENCE
• 影响因子: 4.6
• 作者: Tanaka-Takemura, Yuka;Arisaka, Yoshinori;Yui, Nobuhiko
• 通讯作者: Yui, Nobuhiko

Suppressed Migration and Enhanced Cisplatin Chemosensitivity in Human Cancer Cell Lines by Tuning the Molecular Mobility of Supramolecular Biomaterials

通过调节超分子生物材料的分子迁移率抑制人类癌细胞系的迁移并增强顺铂化学敏感性

• DOI: 10.1002/mabi.202200438
• 发表时间: 2022
• 期刊: Macromolecular Bioscience
• 影响因子: 4.6
• 作者: Hakariya Masahiro;Arisaka Yoshinori;Masuda Hiroki;Yoda Tetsuya;Iwata Takanori;Yui Nobuhiko
• 通讯作者: Yui Nobuhiko