遺伝子変換マウスを用いた個体薬理・生理学研究

使用转基因小鼠进行个体药理学和生理学研究

基本信息

批准号：
16209008
负责人：
野田昌晴
金额：
$ 29.79万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では主に遺伝子ノックアウトマウスの解析を通して、プロテインチロシンホスファターゼζ(PTPζ)とNa_xイオンチャンネルの関わる生命現象とその分子・細胞機構を明らかにすることを目指す。本年度の研究成果は以下の通りである。a)PTPζのシグナル伝達系1.基質分子中の基質サイトの同定PTPζの基質分子中の基質サイトの同定については、昨年度p190 RhoGAP中のY1105が明らかになったが、本年度はGit1(ArfGAP)とMagi1について、そのサイトを決定した。2.PTPζ遺伝子ノックアウトマウスのメタンアンフェタミンに対する不感受性の分子機序について、ドーパミン・トランスポーターの細胞内への取り込み能について細胞生物学的解析を行なった。3.眼におけるPTPζのisoformの多様性について解析を行なった結果、受容体型PTPζがsheddingを受けている可能性が明らかになった。b)Na_xチャンネル1.昨年度Na_xとNa^+,K^+-ATPaseのα1サブユニットが結合していることを見出したが、その後この結合が細胞内Naレベルの上昇に応答してNa^+,K^+-ATPaseが活性化するために必要であることが明らかになった。また、Na_x陽性細胞ではNa^+,K^+-ATPase活性化の結果、糖代謝の増加、並びに乳酸の産生と分泌が上昇することが確認された。2.マウスの尿中におけるバソプレッシン量を測定する系を確立した。

在本研究中，我们主要通过对基因敲除小鼠的分析，旨在阐明与蛋白酪氨酸磷酸酶 z (PTP z) 和 Na_x 离子通道相关的生物学现象及其分子和细胞机制。今年的研究成果如下。 a) PTP z 信号转导系统 1. 底物分子中底物位点的鉴定关于 PTP z 底物分子中底物位点的鉴定，去年明确了 p190 RhoGAP 中的 Y1105，但今年我们将鉴定 p190 RhoGAP 中的 Y1105关于Magi1，我们已经决定了。 2.针对PTPζ基因敲除小鼠对甲基苯丙胺不敏感的分子机制，我们对多巴胺转运蛋白进入细胞的能力进行了细胞生物学分析。 3.对眼内PTPδ亚型多样性的分析揭示了受体型PTPδ发生脱落的可能性。 b) Na_x 通道 1. 去年，我们发现 Na_x 与 Na^+,K^+-ATPase 的 α1 亚基相互结合，结果表明，K^+-ATPase 是激活所必需的。此外，在Na_x阳性细胞中，证实Na^+,K^+-ATP酶激活导致葡萄糖代谢增加以及乳酸产生和分泌增加。 2. 我们建立了一个系统来测量小鼠尿液中加压素的含量。