アポトーシス抵抗性変異細胞株の分離と細胞死の情報伝達機構の解析

抗凋亡突变细胞系的分离及细胞死亡信号转导机制分析

基本信息

批准号：
07672345
负责人：
内藤幹彦
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07672345/
关键词：
アポトーシス ICE Cell fusion Mutant

项目摘要

イ、アポトーシスの情報伝達機構を解析するために、ヒト単球系白血病細胞U937よりアポトーシス抵抗性細胞を分離した。そのうちの1つ、UK110細胞は抗Fas抗体やTNFにより誘導されるアポトーシスに強い抵抗性を示した。UK110では、アポトーシスの実行機構やアポトーシスの情報伝達に関与する既知の分子には異常は見られず、またFas抗原、TNF受容体も親株のU937と同様に発現しているため、アポトーシスの情報伝達にはたらく未知の分子に変異のあることが推測された。UK110のアポトーシス抵抗性の形質が、遺伝的に優勢であるか劣性であるかを調べるため、UK110とUK937の融合細胞を樹立した。得られた融合細胞はいずれもU937と同じアポトーシス感受性を示し、UK110のアポトーシス抵抗性は遺伝的に劣性であることが示された。今後UK110で変異を起こしている分子を同定し、アポトーシスの情報伝達における機能を解析する必要がある。2、U937のアポトーシスにおけるICEファミリープロテアーゼの機能を解析するために、ICEファミリープロテアーゼの選択的阻害剤Z-Asp-CH2-DCBの作用を調べた。U937細胞は抗癌剤、抗Fas抗体、TNF等さまざまな刺激によりアポトーシスを起こすが、Z-Asp-CH2-DCBはいずれの刺激によるU937のアポトーシスも阻害した。しかし、Z-Asp-CH2-DCBを除くと再びアポトーシスが進行することから、ICEファミリープロテアーゼはU937のアポトーシスの実行に重要な機能を担っており、Z-Asp-CH2-DCBはICEファミリープロテアーゼを可逆的に阻害することにより、アポトーシスの進行を一時的に止めていることが推測された。

B.为了分析Apotoshis的信息传递机理，将抗凋亡细胞与人类单白血病细胞分离。其中一个是UK110细胞，表现出对抗FAS抗体和TNF诱导的凋亡的强烈抗性。在UK110中，凋亡的执行机理或细胞凋亡的信息传播以及FAS抗原和TNF受体的表达方式与父母的U937相同，因此，凋亡的执行机制或信息传播的涉及的已知分子无异常假定工作的未知分子是突变的。已经建立了UK110和UK937融合细胞，以检查UK110抗凋亡耐药性在遗传上占主导地位还是较差。所有获得的融合细胞均表现出与U937相同的凋亡敏感性，表明UK110抗凋亡耐药性在遗传上较低。将来，有必要确定在UK110中引起突变的分子并分析细胞凋亡信息传递的功能。 2。为了分析U937凋亡中ICE家族幻想的功能，研究了ICE家族伪装的作用选择器Z-ASP-CH2-DCB。 U937细胞引起各种刺激引起的细胞凋亡，例如抗癌药物，抗FAS抗体和TNF，但是Z-ASP-CH2-DCB也抑制了由于任何刺激而引起的U937凋亡。但是，由于凋亡再次进展，除了Z-ASP-CH2-DCB，冰家族的幻想是导致U937的执行，而Z-ASP-CH2-DCB是ICE家族蛋白酶。暂时阻止了相反的情况。