細胞死阻害タンパク質の機能解析とがん治療への応用

细胞死亡抑制蛋白的功能分析及其在癌症治疗中的应用

基本信息

批准号：
17016021
负责人：
内藤幹彦
金额：
$ 4.99万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17016021/
关键词：
Apollon IAP ユビキチンプロテアソーム HtrA2 セリンプロテアーゼ

项目摘要

アポトーシスを阻害するIAPファミリータンパク質のなかで、apollonは分子量530Kの巨大なタンパク質である。apollonはCaspase9、SMAC、HtrA2などのアポトーシス誘導因子と結合し、ユビキチン・プロテアソームシステムにより分解することによりアポトーシスを阻害する。今年度の研究では、細胞がアポトーシスを起こすとapollonが分解されて減少すること、このapollonの分解にはセリンプロテアーゼ活性をもつHtrA2が重要であることを見出した。すなわちapollonとHtrA2はお互いのタンパク質を分解することによりアポトーシスを制御する事が明らかになった。apollonによるHtrA2の分解にはHtrA2のIAP結合モチーフを介したapollonとの結合が必要であり、apollonのUBCドメインによりHtrA2タンパク質がユビキチン化され、プロテアソームにより分解される。一方HtrA2によるapollonの分解にはHtrA2のIAP結合モチーフは必要ではなく、HtrA2のセリンプロテアーゼ活性ドメインが基質タンパク質としてapollonを認識していると考えられた。HtrA2を野生型マウス胎児繊維芽細胞(MEF)に発現するとアポトーシスを引き起こしたが、プロテアーゼ活性を持たない変異体HtrA2は野生型MEFにアポトーシスを誘導しなかった。しかしapollon欠失MEFではプロテアーゼ活性を持たない変異体HtrA2でもアポトーシスを誘導した。apollon欠失MEFで、HtrA2の各種変異体によるアポトーシス誘導活性を調べた結果、IAP結合モチーフを持つHtrA2はアポトーシスを誘導することが明らかになった。これらの結果から、アポトーシスの過程でミトコンドリアから細胞質に遊離したHtrA2は、apollonを分解し、プロテアーゼ活性とIAP結合モチーフにより細胞死を誘導する可能性が考えられた。

在抑制凋亡的IAP家族蛋白中，阿波隆是一种巨大的蛋白质，分子量为530K。 Apollon结合了凋亡 - 诱导因子，例如caspase9，smac，htra2，并通过泛素蛋白质原生系统分解来抑制凋亡。今年的研究发现，如果细胞引起细胞凋亡，阿波罗分解和减少，并且具有丝氨酸蛋白酶活性的HTRA2对于阿波罗的分解很重要。换句话说，已经揭示了Apollon和Htra2通过分解彼此的蛋白质来控制凋亡。 Apollon对HTRA2的分解需要通过HTRA2 IAP结合基序与Apollon建立键，并且HTRA2蛋白被Apollon UBC结构域泛素化，并被蛋白质分解。另一方面，HTRA2对Apollon的分解不需要HTRA2的IAP结合基序，因此人们认为HTRA2的丝氨酸蛋白酶活性域将Apollon识别为底物蛋白。 HTRA2在野生型小鼠胎儿纤维芽（MEF）中表达时会引起凋亡，但是没有蛋白酶活性的突变体Htra2并未引导凋亡对野生体型MEF。但是，Apollon删除了MEF在没有蛋白酶活性的变体HTRA2中引导凋亡。检查Apollon中HTRA2各种变体的凋亡诱导活性删除了MEF，很明显，具有IAP键基序的HTRA2会诱导凋亡。这些结果表明，在细胞凋亡过程中从Mitochadria中播放的Htra2可能会拆卸阿波罗，并诱导蛋白酶活性和IAP结合基序诱导细胞死亡。