P‐糖蛋白質の血液脳関門機能解明と薬物脳移行制御法の開発

阐明P-糖蛋白的血脑屏障功能并开发控制药物转移至大脑的方法

基本信息

批准号：
06672136
负责人：
辻彰
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、血液脳関門を形成する脳毛細血管内皮細胞において薬物排出ポンプとしてP‐糖蛋白質が機能することにより、薬物の中枢移行性が制御されていることの実証を目的とした。In vitro初代培養脳毛細血管内皮細胞および牛脳切片を用いた免疫組織化学的手法により、P‐糖蛋白質が内皮細胞管腔側膜に存在することを示した。また、脳毛細血管内皮の培養細胞を用いたビンクリスチンなどの抗がん剤やサイクロスポリンAの取り込みおよび排出実験から、P‐糖蛋白質によってこれらの薬物が細胞内から能動的に汲み出しの方向に輸送されていることを明らかにすることができた。さらに、ラット一過性脳虚血による脳内ATPの枯渇時、およびP‐糖蛋白質の特異的な機能阻害剤であるキニジンを脳内への直接投与した時の種々化合物の脳内移行および脳内からの消失を、脳灌流法などのin vivo実験手法を用いて測定した。その結果、抗がん剤のアドリアマイシンやサイクロスポリンAの脳内移行性が特異的に増大し、その増加が脳内からの排出機能の阻害に起因することを明らかにすることができた。これらの薬物の脳内動態変動は、生理的条件下においてもP‐糖蛋白質を介した薬物の脳内からの能動的な排出機構が存在し、本機構により薬物の中枢移行性が制限されていることを示している。以上の結果より、P‐糖蛋白質による脳からの排出機構の利用、あるいはP‐糖蛋白質を阻害することにより、薬物の中枢移行性制御が可能であることが示された。

本研究的目的是证明药物的中央分布是由 P-糖蛋白控制的，P-糖蛋白在形成血脑屏障的脑毛细血管内皮细胞中充当药物流出泵。利用体外原代培养的脑毛细血管内皮细胞和牛脑切片的免疫组织化学技术表明，P-糖蛋白存在于内皮细胞的管腔膜中。此外，使用培养的脑毛细血管内皮细胞摄取和分泌抗癌药物（例如长春新碱和环孢菌素A）的实验表明，这些药物被P-糖蛋白积极地从细胞中泵出。运输。此外，我们研究了各种化合物的脑内转移以及大鼠短暂性脑缺血引起的脑内 ATP 消耗的影响，并且当将奎尼丁（一种特定的 P-糖蛋白功能抑制剂）直接施用到脑中时，使用测量了内部消除。脑灌注等体内实验技术。结果，我们能够证明抗癌药物阿霉素和环孢菌素A的脑分布特别增加，并且这种增加是由于抑制了它们从脑中的排泄功能。这些药物的脑内动力学变化是由于即使在生理条件下也存在药物通过P-糖蛋白从脑中主动排泄的机制，并且该机制限制了药物的中枢分布。上述结果表明，利用P-糖蛋白或抑制P-糖蛋白从脑中的排泄机制，可以实现药物的中枢控制。