筋萎縮性側索硬化症に対するG-CSF療法の開発

G-CSF治疗肌萎缩侧索硬化症的进展

基本信息

批准号：
18659260
负责人：
吉良潤一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

1.変異SOD1^<G93A>遺伝子導入マウスへのG-CSF皮下投与による治療効果の検討。変異SOD1^<G93A>遺伝子導入マウスに、生後10週よりG-CSF製剤と対照コントロールとして生理食塩水の皮下投与(5日投薬、2日休薬)を死亡あるいは評価時期まで施行した。まず、臨床的評価では、G-CSF投与により、有意に生存期間の延長効果を認めた。次に、運動神経細胞死の抑制効果を調べるために、両群での発症前期(生後12週、14週)、麻痺症状出現期におけるL5前根の正常大径有髄線維数の変化を比較した。12週の時点から少数の神経線維の変性を認めた。14週では、さらに正常線維数の減少を認めたが、両群での有意差を認めなかった。しかし、麻痺症状出現期においては、G-CSF投与群で有意差をもって正常線維数の残存を認めた。また、G-CSFの作用機序の解明のために、麻痺症状出現期、死亡期において、抗アポトーシス蛋白(bcl-2タンパク)の発現量とその変化を検討した。両時期においても、G-CSF投与群で、bcl-2タンパクの発現量の増加を認めたが、死亡期では有意に増加していた。以上の結果から、変異SOD1^<G93A>遺伝子導入マウスに対して、G-CSF療法(皮下投与)は、bcl-2タンパクなどの抗アポトーシス蛋白の誘導により、運動神経細胞死の抑制や延命効果をおこすことが明らかにされた。2.G-CSFの長期間皮下投与による副作用の検討上記1同様にG-CSFを投与した。5日連続投与後でも、末梢血での白血球数増加、血小板数増加を認めた。生後10週から死亡するまで(約20週)投与したマウスでは、G-CSF投与による副作用死は認めなかったものの、全例で肝・脾腫を認めた。また、骨髄塗沫標本では、G-CSF投与による白血病細胞などの出現は認めなかった。

1.检查对携带突变型SOD1^<G93A>基因的小鼠皮下给予G-CSF的治疗效果。突变型SOD1^<G93A>转基因小鼠从出生后10周直至死亡或评价时皮下施用G-CSF制剂和作为对照的生理盐水(5天，休息2天)。首先，临床评价表明G-CSF给药显着延长了生存时间。接下来，为了检查对运动神经元细胞死亡的抑制作用，我们比较了发病早期（出生后12周和14周）和发病阶段L5腹侧根正常大直径有髓纤维数量的变化两组均出现麻痹症状。从12周起观察到少量神经纤维变性。 14周时，观察到正常纤维数量进一步减少，但两组之间没有观察到显着差异。然而，在出现麻痹症状期间，G-CSF施用组中的纤维数量仍保持正常，但存在显着差异。此外，为了阐明G-CSF的作用机制，我们研究了麻痹症状出现和死亡阶段抗凋亡蛋白（Bcl-2蛋白）的表达水平和表达水平的变化。在G-CSF施用组中，在两个时期都观察到bcl-2蛋白的表达水平增加，但在死亡期间显着增加。由以上结果可知，G-CSF治疗(皮下给药)通过在突变型SOD1^<G93A>基因转染的小鼠中诱导Bcl-2蛋白等抗凋亡蛋白，具有抑制运动神经元细胞死亡、延长生存期的效果。据透露，它会导致2.长期皮下给予G-CSF引起的副作用的检查 G-CSF以与上述1相同的方式给予。即使连续给药5天后，观察到外周血中白细胞和血小板数量的增加。在从 10 周龄直至死亡（约 20 周）的小鼠中，没有观察到因施用 G-CSF 引起的副作用而死亡，但在所有小鼠中均观察到肝脏和脾肿大。此外，由于给予G-CSF，在骨髓涂片标本中未观察到白血病细胞。