マラリア原虫の媒介蚊唾液腺侵入過程を標的とした感染阻止法の開発

针对疟疾寄生虫唾液腺侵袭过程的感染预防方法的开发

基本信息

批准号：
16659111
负责人：
油田正夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

マラリア原虫は、蚊の吸血を介してヒトからヒトへと伝播される。マラリアを根絶するためには、蚊による媒介を阻止する有効な方策の創出が急務である。本研究はこの課題を、1.媒介蚊への原虫の感染を阻止する分子の開発、2.昆虫ウイルスベクターを用いた媒介蚊での外来遺伝子発現法の開発によって実現することを目的とする。すなわち申請者が新たに発見した原虫の唾液腺侵入に必須である蛋白分解酵素"スポロパイン"(スポロゾイトの唾液腺基底膜通過に必要と考えられる)に対するインヒビターを作出する。また新たな媒介蚊特異的ウイルスを探索し、このウイルスをベクターとして用い、開発したインヒビターを媒介蚊に発現させることで感受性蚊を非感受性蚊に変える手法を確立する。この手法を用いれば非感受性蚊はウイルス自体が自然伝播することで広がり、現実的な感染阻止法になると期待できる。蚊での外来遺伝子発現ベクターとして使用するため、野生の蚊からの昆虫ウイルスの分離を試みた。その結果、新種のフラビウイルスの分離に成功した。このウイルスは蚊に潜在感染し、また伝播能力も極めて高いためベクターとして理想的である(投稿準備中)。現在感染性cDNAを構築し、外来遺伝子発現のための改良を行っている。またスポロパインを小麦胚芽を用いたin vitro translation法により可溶性蛋白として発現することに成功した。現在この蛋白を用いスポロパインの生化学的特性を明らかにするとともに、インヒビターの開発を行っている。

疟疾寄生虫通过蚊子的血粉在人与人之间传播。为了根除疟疾，迫切需要制定有效措施来防止蚊子传播疾病。本研究的目的是通过以下方式实现这一目标：1.开发阻止原生动物向媒介蚊子传播的分子，2.开发一种使用昆虫病毒载体在载体中表达外源基因的方法。换句话说，我们将创建一种针对蛋白水解酶“孢子蛋白酶”的抑制剂，申请人新发现这种酶对于原生动物侵入唾液腺至关重要（这被认为是子孢子穿过唾液腺基底膜所必需的）。我们还将寻找新的载体特异性病毒，并建立一种方法，通过使用该病毒作为载体并在载体蚊子中表达所开发的抑制剂，将易感蚊子转化为非易感蚊子。使用这种方法，病毒本身将通过非易感蚊子之间的自然传播进行传播，有望成为预防感染的现实方法。我们试图从野生蚊子中分离昆虫病毒，用作蚊子的外源基因表达载体。结果，他们成功分离出一种新型黄病毒。该病毒潜伏感染蚊子，具有极高的传播性，非常适合作为载体（准备提交）。我们目前正在构建感染性 cDNA 并对其进行改进以实现外源基因表达。我们还利用小麦胚芽通过体外翻译方法成功地将孢子素表达为可溶性蛋白质。我们目前正在使用这种蛋白质来阐明孢子蛋白酶的生化特性并开发抑制剂。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

CelTOS, a novel malarial protein that mediates transmission to mosquito and vertebrate hosts

DOI：
10.1111/j.1365-2958.2005.05024.x
发表时间：
2006-03-01
期刊：
MOLECULAR MICROBIOLOGY
影响因子：
3.6
作者：
Kariu, T;Ishino, T;Yuda, M
通讯作者：
Yuda, M

A Plasmodium sporozoite protein with a membrane attack complex domain is required for breaching the liver sinusoidal cell layer prior to hepatocyte infection

DOI：
10.1111/j.1462-5822.2004.00447.x
发表时间：
2005-02-01
期刊：
CELLULAR MICROBIOLOGY
影响因子：
3.4
作者：
Ishino, T;Chinzei, Y;Yuda, M
通讯作者：
Yuda, M

Essential role of membrane-attack protein in malarial transmission to mosquito host

DOI：
10.1073/pnas.0406187101
发表时间：
2004-11-16
期刊：
PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
影响因子：
11.1
作者：
Kadota, K;Ishino, T;Yuda, M
通讯作者：
Yuda, M

A Plasmodium sporozoite protein witn a membrane attack complex domain is required for breaching the liver sinusoidal cell layer prior to hepatocyte infection.

在肝细胞感染之前，需要具有膜攻击复合物结构域的疟原虫子孢子蛋白来破坏肝窦细胞层。