細胞膜修飾剤を使った機能性タンパク質アンカーリング法による新規腫瘍免疫誘導法開発

利用细胞膜修饰剂的功能性蛋白锚定方法开发新型肿瘤免疫诱导方法

• 批准号: 15656208
• 负责人: 長棟 輝行
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15656208/
• 关键词: 樹状細胞; 樹状細胞養子免疫療法; 抗体; Fcレセプター; オプソニン化; CTL; 腫瘍免疫; 細胞膜修飾剤; 腫瘍免疫誘導; 抗原提示細胞; 細胞貪食能

悪性腫瘍に対する樹状細胞(DC)養子免疫療法における腫瘍特異的成熟樹状細胞の調製法及びその効果に関する研究成果である。前年度、フルオレセイン(FL)を結合させた細胞膜修飾剤Biocompatible Anchor for Membrane (BAM)をマウスTリンパ腫EL-4の細胞膜に結合させ、さらに抗FL抗体(マウスモノクローナル抗体IgGl)を結合させた抗体結合型EL-4は無処理のEL-4に比べてマウスマクロファージ細胞株WEHI-3に貪食が促進されたことを報告した。今年度はマウスマクロファージ細胞株の代わりにマウスから摘出した樹状細胞を用いる研究を始めた。(1)マウス大腿骨より骨髄細胞を採取し未成熟DCを誘導した。FLを結合させたBAMと抗FL抗体をつかって抗体結合型EL-4を作製した。このEL-4と未成熟DCを混合培養した結果、無処理のEL-4に比べ、抗体結合型EL-4の方がDCのEL-4細胞貪食活性を高めることがわかった。さらに抗体を結合したEL-4を貪食したDCは、DC成熟マーカーであるCD86及びMHC class II(I-A^b)の発現が増加していることも確認できた。(2)抗体を結合したEL-4を貪食したDCをマウス腹腔内へ投与し、EL-4特異的抗腫瘍活性をもつCTLを誘導した。このマウスからCTLを含む脾臓細胞を採取しEL-4細胞と混合培養したところ、EL-4に対して細胞傷害活性が認められた。これらの結果より、腫瘍細胞に対して結合性を持たない抗体をBAMにより腫瘍細胞に強制的に結合させることによってDCに貪食されやすい腫瘍細胞を調製することができた。さらにその腫瘍細胞を貪食したDCをマウス体内に投与することにより腫瘍特異的な細胞傷害活性をもつCTLを誘導できた。

这是肿瘤特异性成熟树突状细胞的制备方法及其在树突状细胞（DC）过继免疫治疗恶性肿瘤中的研究成果。去年，我们进行了一项抗体偶联研究，将荧光素（FL）偶联的细胞膜修饰剂生物相容性膜锚（BAM）偶联到小鼠T淋巴瘤EL-4的细胞膜上，然后将抗FL我们报道，与未处理的EL-4相比，EL-4型EL-4的吞噬作用在小鼠巨噬细胞系WEHI-3中得到促进。今年，我们开始使用从小鼠中分离的树突状细胞代替小鼠巨噬细胞系进行研究。 (1)从小鼠股骨采集骨髓细胞，诱导未成熟的DC。使用 FL 缀合的 BAM 和抗 FL 抗体创建抗体缀合的 EL-4。将该EL-4和未成熟DC混合培养的结果发现，与未处理的EL-4相比，抗体结合的EL-4增强了DC的EL-4细胞吞噬活性。此外，已证实，在吞噬了抗体结合的EL-4的DC中，DC成熟标记物CD86和MHC II类(I-A^b)的表达增加。 (2)将具有吞噬抗体缀合的EL-4的DC给予小鼠腹腔注射以诱导具有EL-4特异性抗肿瘤活性的CTL。当从该小鼠采集含有CTL的脾细胞并与EL-4细胞混合培养时，观察到针对EL-4的细胞毒活性。基于这些结果，通过使用BAM强制结合不具有与肿瘤细胞结合特性的抗体，可以制备容易被DC吞噬的肿瘤细胞。此外，通过将吞噬肿瘤细胞的DC给予小鼠，可以诱导具有肿瘤特异性细胞毒活性的CTL。