副腎腫瘍におけるステロイド17α-水酸化酵素発現異常のメカニズム〜核内オーファンレセプターCOUP-TF及びCOUP-TF結合蛋白の関与の検討〜

肾上腺肿瘤中类固醇17α-羟化酶异常表达的机制〜核孤儿受体COUP-TF和COUP-TF结合蛋白参与的检查〜

基本信息

批准号：
12770620
负责人：
柴田洋孝
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770620/
关键词：
核内受容体 COUP-TF 副腎腫瘍 CYP17 Yeast two-hybrid system corepressor coactivator SF-1 DAX-1 オーファンレセプター

项目摘要

昨年度までの検討により、副腎皮質および副腎皮質腫瘍において、糖質コルチコイドおよび副腎アンドロゲン産生の鍵となるステロイド17α-hydroxylase(CYP17)の発現が、核内オーファン受容体COUP-TFおよびDAX-1により制御されている可能性が強く示唆された。そこで、COUP-TFに着目し、その受容体と特異的に相互作用し、COUP-TFによる転写抑制に関与するcorepressorタンパク質を明らかにすることにより、ホルモン産生異常のメカニズムが明らかになる可能性が期待された。そこで本年度は、昨年度に作製した副腎皮質腫瘍cDNAライブラリーを用いて、核内受容体COUP-TFIと蛋白-蛋白相互作用を有するクローンのスクリーニングを行った。スクリーニングの結果、COUP-TFI,COUP-TFIIおよびSF-1と有意な相互作用を有するCIP-1(COUP-TFI-interacting protein-1)を同定することに成功した。CIP-1は、open reading frameが1.1kb cDNAであり、約18kDaの分子量を示すタンパク質であった。CIP-1は、COUP-TFIによる転写抑制を有意に増強することがCOS-1細胞におけるtransient transfection asssayにより確認された。また、大変興味深いことに、CIP-1タンパク質はライブラリーを作製したCushing症候群副腎の腫瘍部において、付随正常副腎と比べて有意に高発現を認めたことより、Cushing症候群の腫瘍部におけるホルモン産生異常に関わる可能性が示唆された。今後、この結果をもとに、CIP-1の機能解析および副腎腫瘍における役割を解明していく予定である。

在去年的研究中，由于核东方受体政变-TF和DAX-1，在糖皮质激素和肾上腺皮质肿瘤中产生的糖皮质激素和肾上腺素产生的关键是类固醇的表达（CYP17）强烈建议被控制。因此，通过关注政变，受体与受体特别相互作用，并澄清涉及coupy-tf中转移的核心蛋白，可以揭示产生激素异常的机制。因此，今年，使用去年制备的肾上腺皮质肿瘤cDNA文库，我们筛选了带有核受体coupt-tfi和蛋白质互连的克隆。由于筛查的结果，我们成功地识别了具有重大相互作用的CIP-TFI，COUP-TFII和SF-1。 CIP-1是一种蛋白质，具有开放式阅读框1.1kb cDNA和约18KDA分子量。 CIP-1通过COS-1细胞中的Transment Tresstoction关联证实，通过COUP-TFI显着增强转移控制。此外，与伴随的库欣肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺肾上腺肿瘤相比，CIP-1蛋白是库欣综合征肿瘤中产生激素的异常。将来，基于此结果，我们计划阐明CIP-1的功能分析以及在肾上腺肿瘤中的作用。