转录因子COUP-TF影响公猪膻味的生物学功能和分子机理研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    31000546
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    19.0万
  • 负责人：
    刘宇
  • 依托单位：
    中国人民解放军第三军医大学
  • 学科分类：
    C0602.基因表达及非编码序列调控
  • 结题年份：
    2013
  • 批准年份：
    2010
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2011-01-01 至2013-12-31

项目摘要

全公猪具有显著社会经济效益，但膻味严重限制了其养殖的推广和实施。膻味化学物质是雄烯酮和粪臭素。体外研究初步表明COUP-TF参与了甾体合成及粪臭素主要代谢酶CYP2E1的表达调控，可能在膻味物质合成代谢过程中扮演着重要的角色，因此成为公猪膻味性状分子遗传研究中备受关注的基因。但目前还缺乏COUP-TF基因在猪体内表达与雄烯酮和粪臭素代谢沉积相关的直接证据。为了分析COUP-TF对公猪膻味的影响，本研究拟选择高低膻味猪品系，利用qRT-PCR，HPLC等技术分析COUP-TF与膻味化合物合成代谢途径中CYP17、STAR、CYP2E1基因的表达及表型的关系；利用EMSA和细胞模型，研究COUP-TF对上述基因的表达调控，以期阐明猪COUP-TF影响公猪膻味的生物学功能，揭示该基因对膻味调控的分子机理。该研究的完成具有重要理论价值，并可为从分子水平改良公猪膻味提供理论基础和实践指导。

结项摘要

本课题的完成情况及取得成果如下：1.获得不同种属和不同年龄阶段猪血样和组织样本；2.建立了qRT-PCR定量分析不同组织样本的方法，获得不同猪种和不同年龄阶段猪肝脏和睾丸组织中COUP-TF基因及膻味化合物合成和代谢主要相关基因的表达水平数据；3.建立粪臭素的HPLC分析方法，建立雄烯酮的ELISA分析方法，分析获得了不同猪种和不同年龄阶段血浆、肌肉、肝脏样本膻味物质的含量；4.扩增获得猪COUP-TF、CYP2E1等基因，并构建了猪COUP-TF的真核表达载体；5.培养猪睾丸细胞，建立了基于Roche Fugene介导转染的猪睾丸细胞基因转染技术体系，并构建COUP-TF基因转基因细胞模型；6.利用转基因细胞模型分析COUP-TF基因与相关膻味基因及膻味表型的关系；7.获得COUP-TF基因在猪中的时空表达规律和CYP17、STAR、CYP2E1基因及膻味性状相关性的分析结果；8.发表SCI研究论文2篇，准备投出2篇，发表核心期刊2篇；9.获得专利1项，申请专利1项。

项目成果

期刊论文数量（4）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
仔猪睾丸间质细胞培养方法的比较
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国兽医杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘宇
  • 通讯作者：
    刘宇
A Study on Optimizing the Cryopreservation Methods for Bama Miniature Pig Semen
巴马小型猪精液冷冻保存方法优化研究
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2012
  • 期刊：
    Experimental Animals
  • 影响因子：
    2.4
  • 作者：
    Guo, Kenan;Liu, Yu;Zhang, Jiahua（*）;Wei, Hong（*）
  • 通讯作者：
    Wei, Hong（*）
Constitutive expression of CYP3A mRNA in Bama miniature pig tissues
巴马小型猪组织中CYP3A mRNA的组成型表达
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    Gene
  • 影响因子：
    3.5
  • 作者：
    Haitao Shang;Kenan Guo;Yu Liu
  • 通讯作者：
    Yu Liu
巴马香猪类固醇激素急性调节蛋白(StAR)基因真核表达载体的构建及鉴定
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2013
  • 期刊：
    中国兽医杂志
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    刘宇
  • 通讯作者：
    刘宇

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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    单世华
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  • 作者：
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  • 通讯作者：
    孟凡明

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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