アンチセンス核酸の表皮抗原提示細胞へのデリバリー法の開発

开发将反义核酸递送至表皮抗原呈递细胞的方法

• 批准号: 09772031
• 负责人: 有馬 英俊
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kumamoto University (1998)Tokyo University of Pharmacy and Life Science (1997)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09772031/
• 关键词: アンチセンス抗原; 経皮デリバリー; 表皮抗原提示細胞; リボソーム; イオンフォレーシス; アンチセンス核酸; リポソーム; イオンフォレ-シス

マウスIL-10mRNAに相補的な配列を有するアンチセンスDNA(AS-D-oligo,AS-S-oligo)の表皮抗原提示細胞への送達性の向上に関する基礎的検討として,ヘアレスマウスの背部皮膚を用いてAS-oligoの皮膚透過性におよぼすイオントフォレーシス(IP)法の影響をinvitroおよびinvivoにおいて検討した.また,IP法はその電気的パターンの違いにより,直流(DC)型,交流型などに分類されるが,本研究では皮膚刺激性が低いパルス脱分極(PDP)型を用いた.Invitro実験:AS-S-oligo単独では全く皮膚に浸透しないのに対して,IPを適用した場合,その電流強度およびAS-oligo添加濃度の増加に従い皮膚浸透性は増大し,0.3mA,6時間通電後の累積皮膚浸透率は約60%を示したまたこのPDP型皮膚透過促進効果はDC型に比べて大きく,PDP型IP法の優れた効果が明らかとなった.しかし,皮膚中においてintactなAS-D-oligoはほとんど認められず,DNaseによる分解が示唆されたが,AS-S-oligoは比較的安定であった.Invivo実験:invitroの結果をよく反映して,IPを適用した場合,その電流強度およびAS-Oligo添加濃度の増加に従い皮膚浸透性は増大した.また,皮膚中にintactなAS-S-Oligoが確認された.また,最近行った予備的検討において,アトピー性皮膚炎モデルマウスNC/Ngaマウスの皮膚中に過剰発現しているIL-10mRNAレベルはAS-S-oligoをIP法で浸透させることにより,顕著に低下させ,AS-S-oligoのアンチセンス効果がinvivoで確認された.以上の知見は,,AS-S-oligoの表皮抗原提示細胞中への効果的なデリバリー法としてPDP型IP法の有用性を示唆するものである.

作为一项关于改善反义DNA（AS-D-Oligo，AS-S-Oligo）的基础研究，该序列与小鼠IL-10 mRNA与表皮抗原呈现细胞的序列相辅相成，我们研究了离子噬菌体（IP）方法对使用背层皮肤无毛小鼠皮肤的皮肤耐受性的影响。此外，IP方法基于电气模式的差异和DC型可互换类型。尽管将其分类为流动类型，但本研究使用了脉搏去极化（PDP）类型，皮肤刺激性低。 Invitro experiment: AS-S-oligo alone does not penetrate the skin at all, but when IP was applied, the skin permeability increased according to the increase in current strength and AS-oligo concentration, and the cumulative skin penetration after energization for 6 hours at 0.3mA was 0.3mA, and this PDP-type skin permeation promoter was greater than that of DC-type, and the PDP-type IP method was superior.效果揭示了。然而，在皮肤中几乎没有观察到完整的AS-D-Oligo，这表明它是由DNase分解的，但是AS-S-Oligo相对稳定。 Intivo实验：反映Invitro的结果，随着当前强度和AS-Oligo浓度的增加，皮肤渗透性随着IP的增加而增加。此外，在皮肤中证实了完整的AS-S-Oligo。在最近的一项初步研究中，使用IP方法通过AS-S-Oligo浸润，在NC/NGA小鼠皮肤中过表达的IL-10 mRNA水平显着降低，并且在Vivo中证实了AS-S-S-Oligo的反义作用。上面的发现表明，PDP型IP方法作为对表皮抗原呈递细胞的有效递送方法的有用性。