脳梗塞形成過程における小胞体輸送関連蛋白RA410の変動に関する実験的研究

脑梗死形成过程中内质网转运相关蛋白RA410变化的实验研究

基本信息

批准号：
09770465
负责人：
西村裕之
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hyogo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

目的:平成9年度に引き続きRA410の脳虚血時における脳内動態およびその機能について検討した。方法と結果(1)ラット左中大脳動脈一過性虚血により、虚血再潅流30分後には、梗塞巣の中心部のMAP2の染色性が低下し始めた部位に一致してRA410はグリア細胞に軽度発現した。さらに再潅流6時間後にはMAP2の染色性の消失部位に一致してRA410は大脳皮質の神経細胞に高度に観察された。(2)in situ hybridization histochemistryを用いて、ラット左中大脳動脈一過性虚血負荷後のRA410mRNA動態を検討した。コントロール群では神経細胞に極く軽度にシグナルを認めた。虚血再潅流2時間後には虚血領域の大脳皮質のグリア細胞と神経細胞の両者でシグナルの増強が観察された。虚血再潅流6時間後には虚血中心部においてさらに顕著にシグナルは増強していた。虚血再潅流24時間後には虚血領域でシグナルは消失した。(3)培養アストロサイトを用いアンチセンスによるRA410産生抑制が低酸素負荷後のアストロサイトによるサイトカイン放出に与える影響を培養液中に放出されるインターロイキン6(IL-6)をWestern blottingで測定することにより評価した。その結果、センス導入細胞においてはIL-6の培養液中ヘの放出が観察されたが、アンチセンス導入細胞ではRA410の発現は認められず、IL-6の放出もほぼ抑制された。考察:以上の所見は、RA410は梗塞形成過程でのストレス応答としてIL-6などのサイトカインの活性蛋白分泌に関与する蛋白ではあるが、従来報告されているストレス蛋白、すなわちtrascriptiontはされるがranslationまでなされない蛋白とは異なり、神経細胞死に至る過程の中でさえ合成される蛋白質であることが示唆された。

目的：在1997年继续，我们研究了脑缺血期间RA410的脑动力学和功能。方法和结果（1）大鼠左中部动脉中的短暂性缺血引起30分钟的缺血和RA410在神经胶质细胞中轻度表达，这与梗塞灶中心中MAP2染色的部位一致，在缺血性渗透 - 再缺血 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 再生 - 染色。此外，再灌注6小时后，在大脑皮层中的神经元中高度观察到RA410与MAP2染色部位一致。（2）使用组织化学的原位杂交，我们研究了大鼠左中部大脑中部动脉的短暂性缺血性负荷后的RA410 mRNA动力学。在对照组中，在神经元中观察到极度温和的信号。缺血再灌注两个小时后，在缺血区域的脑皮质中观察到信号增强。缺血再灌注六个小时后，缺血中心的信号更为明显。缺血再灌注后24小时，该信号在缺血区域消失。（3）使用培养的星形胶质细胞，通过测量使用Western印迹释放到培养基中的白介素6（IL-6）来评估缺氧后，抑制反义RA410产生对缺氧后星形胶质细胞释放的影响。结果，在感官转导的细胞中观察到IL-6在培养基中的释放，但是在反义转移的细胞中未观察到RA410的表达，并且几乎抑制了IL-6的释放。讨论：以上发现表明，RA410是一种蛋白质，参与了细胞因子（例如IL-6）在梗塞形成过程中作为应激反应的活性蛋白质，但与先前报道的应激蛋白不同，即一种蛋白质，即不是Trascriptiont但甚至不是奔跑的蛋白质，甚至是在Neuronal neuronal neuronal neral of neuronal neral ner neuronal ner ner neuronal ne ner neuronal ne ner neuronal is n neuronal n of neuronal is ne n neuronal n n of neuronal n n of neuronal is contract tos的反应。