インスリン応答性の糖輸送体（GLUT4）遺伝子の発現調節機序の解明

阐明胰岛素反应性糖转运蛋白（GLUT4）基因的表达调控机制

基本信息

批准号：
09770050
负责人：
池本真二
金额：
$ 1.47万
依托单位：
National Institute of Health and Nutrition
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770050/
关键词：
GLUT4 トランスジェニックマウス運動シスエレメント

项目摘要

マウスGLUT4ミニジーンの5'欠失ミュータントを導入したトランスジェニックマウスを作成し、組織特異的なシスエレメントと運動による発現増加に関与するシスエレメントを検討した。転写開始点より上流の3237bp、2000bp、1000bp、442bp、全てのエキソン・イントロン、約1kbの下流領域を含むマウスGLUT4ミニジーンを導入したトランスジェニックマウスを作成した。各々のGLUT4mRNAの発現を各組織において検討したところ、-3237、-2000、-1000のトランスジェニックマウスでは、内因性同様に骨格筋、脂肪組織(白色・褐色)、心筋において強い発現が認められた。しかし、-442のトランスジェニックマウスでは、骨格筋、心筋においては、比較的強い発現が認められたが、白色脂肪組織では弱く、褐色脂肪組織では発現が認められなかった。これらの結果から、-1000と-442の間にWAT特異的なエンハンサーが存在すること、-1000と-442の間にBAT特異的な強いエンハンサーが存在することが明らかになった。また、運動に反応するシスエレメントを調べる目的で、各々のトランスジェニックマウスに30分、4セットのスイミングを3週間行わせた。-3237、-2000、-1000のトランスジェニックマウスでは、内因性GLUT4mRNA量、ミニジーンGLUT4mRNA量ともに増加していた。しかし、-442のトランスジェニックマウスでは、内因性GLUT4mRNA量が増加していたにもかかわらず、ミニジーンGLUT4mRNA量は変わらなかった。以上の結果より、運動によるGLUT4発現増加に関与するシスエレメントが、-1000と-442の間に存在していることがわかった。現在、-700と-550のトランスジェニックマウスを作成し、さらに狭い領域でのシスエレメントを同定中である。また同時に、ゲルシフト、フットプリントの系も検討中である。

我们用小鼠Glut4 mini -scenes 5'缺失突变体创建了转基因小鼠，并检查了涉及组织特异性SIS元素的SIS元素，并通过运动增加了表达。具有3237bp，2000bp，1000bp，442 bp的转基因小鼠，所有外部内含子和约1KB的下游面积，它们是从传输起点上游上游的。当每个组织中检查每个GLUT4MRNA的表达时，-3237，-2000和-1000的转基因小鼠在骨骼肌肉，脂肪组织（白 /棕色）和心肌肌肉中显示出强烈的表达。然而，-442的转基因小鼠在骨骼肌和心脏肌肉中的表达相对较强，但在白脂肪组织中却较弱，并且棕色脂肪组织没有表达。这些结果表明，-1000和-442之间的WAT特异性增强子的存在，并且在-1000和-442之间存在强大而强大的增强子。此外，为了检查运动，将转基因小鼠与每只转基因小鼠进行30分钟，持续三周。 -3237，-2000和-1000只转基因小鼠增加了内源性GLUT4MRNA和迷你筛子GLUT4MRNA。然而，在-442转基因小鼠中，尽管内源性glut4mRNA量增加，但小筛子glut4mRNA的量没有改变。从上述结果中，已经发现，通过在-1000和-442之间的运动中，GLUT4表达的增加涉及SIS元素。目前，已经创建了-700和-550只转基因小鼠，并且正在识别狭窄区域的SIS元素。同时，正在考虑Gelsift和足迹系统。