Dynamic in vivo fluorescence imaging analysis of Immunocytes relevant to salivary IgA production.

与唾液 IgA 产生相关的免疫细胞的动态体内荧光成像分析。

基本信息

批准号：
20H03902
负责人：
片岡宏介
金额：
$ 11.56万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、免疫誘導組織鼻咽腔関連リンパ組織(NALT)を介した唾液抗原特異的分泌型IgA抗体の産生メカニズムを明らかにするためのリンパ球動態解析を行うことである。昨年度は、経鼻ワクチン投与後NALT 樹状細胞が増加することが認められ、投与24時間後におけるNALT B細胞のAID遺伝子の強発現が認められ、また48時間後の顎下唾液腺B細胞においてもAID遺伝子強発現が認められたことから、NALT樹状細胞がNALTおよび顎下唾液腺のB細胞クラススイッチングを誘導している可能性を示唆した。２年目の本年度は、NALTおよび顎下唾液腺におけるB細胞が同部でIgAクラススイッチングが起こっているのかを、Iμ-Cα transcripts 遺伝子の発現により検討を行ったところ、経鼻ワクチン投与後24時間後のNALT B細胞、48時間後の顎下唾液腺　B細胞において、Iμ-Cα transcripts遺伝子の有意な発現が認められた。さらに、波長436 nmのUV光を照射することにより緑色から赤色に変化する細胞を有するKikGRマウスを用い、NALT部への光照射後の顎下唾液腺、耳下唾液腺、舌下唾液腺における樹状細胞およびB細胞の動態解析をフローサイトメトリー法を用い行った。すなわち光照射24時間後におけるPhycoerythrin (PE)標識細胞を抗CD11c抗体、抗B220抗体染色によるポピュレーション解析を行なったところ、顎下唾液腺および耳下唾液腺におけるNALT 樹状細胞、NALT B細胞と比較して、舌下腺におけるNALT 樹状細胞、NALT B細胞のポピュレーションが高く認められた。

在这项研究中，应分析淋巴管分析，以阐明通过免疫分泌组织相关淋巴组织（NALT）的唾液抗原特异性IgA抗体的IgA抗体的生产机制。去年，鼻疫苗后，它可以增加NALT树突状细胞，并在识别出给药后24小时识别出NALT B细胞的辅助基因，甚至在下巴唾液腺B细胞中，也48小时后。面向的表明，NALT树突状细胞可能诱导NALT和CHIN唾液腺体中的B细胞类转换。在第二年的这个财政年度中，当NALT和较低唾液腺中的B细胞通过Iμ-Cα转录基因的表达检查时，检查了唾液腺中的B细胞是否在同一区域。在后来的NALT B细胞中，48小时后唾液腺B细胞发现了Iμ-Cα转录本基因的显着表达。此外，通过使用具有436 nm的紫外线，使用的紫外线，发光的唾液腺，唾液唾液和NALT部分中的唾液腺可以通过辐射436 nm的紫外线来变化，并使用动态分析。使用F流现场计量方法使用B细胞。换句话说，通过抗-cd11c抗体，抗-b220抗体染色24小时后，将植物染色剂染色（PE）信号细胞进行了24小时的光照射。