歯周病原性菌のペリクルへの付着を阻害するペプチドの連鎖球菌への遺伝子導入と発現

将抑制牙周病原菌附着于表膜的肽基因导入链球菌并表达

基本信息

批准号：
09771829
负责人：
片岡宏介
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

有力な歯周病原性細菌と考えられているPorphyromonas gingivalisは、その主たる付着因子である線毛を介して特定の唾液タンパク質と強固な結合をすることにより、口腔内での定着を果たしていると考えられている。我々は、既にP.gingivalis線毛がペリクル中の主たる唾液成分であるProline-rich protein(PRP1)のカルボキシル末端部分(130-150残基;PRP-C)において特異的に結合し、口腔常在菌であるStreptococcusgordoniiのコンピテントセルにPRP-Cをコードする遺伝子を挿入したプラスミドを構築・導入・形質転換したS.gordonii菌株を作製した。また、この形質転換株を液体培地にて培養、培養液中へのPRP1フラグメントの分泌を確認している。本研究では、まず、合成PRP1フラグメントと抗PRP1フラグメントに対する抗体を用いることにより、形質転換したS.gordonii菌株培養液中のPRP1フラグメントの分泌量をELISA法により測定した。次に、培養液を用いたP.gingivalis線毛のPRP1被覆ハイドロキシアパタイトへの結合阻害実験を行った結果、60-80%の阻害効果が認められた。また、合成PRP-C及び、この培養上清を用いて、P.gingivalisとブラーク形成菌である数種の口腔レンサ球菌との共凝集抑制実験を行ったところ、44-81%の抑制効果を認めた。これらの結果は、形質転換した口腔常在菌を用いることにより、歯周病原性菌であるP.gingivalisの口腔内への初期付着と他のプラーク形成菌とのプラーク形成抑制を示唆するものである。

被认为是牙周致病细菌的卟啉单胞菌牙龈人认为，它已经通过谱系强烈结合特定的唾液蛋白在口腔中建立。我们已经在富含脯氨酸的蛋白质（PRP1）的羧基端（130-150个残基； PRP-C）中结合，这是P.gangivalis线性头发的主要唾液成分。在编码PRP-C的细菌中，在特征中建立了，引入和转化。此外，将这种转化的菌株培养在液体培养基中，并确认培养物中PRP1片段的分泌。在这项研究中，通过使用抗体使用合成PRP1片段和抗-pRP1片段的抗体，通过ELISA方法测量了转化的S.gordonii库存培养溶液中的PRP1片段量。接下来，使用培养溶液对Prp1羟基头发的prp1羟基的结合实验被认为是60-80％的抑制作用。此外，使用合成的PRP-C和该培养物上清液，与铜菌的合作制造商收集实验，是一种铜细菌，我承认了44-81％的对照效应。这些结果表明，转化的口服土著细菌用于抑制斑块形成，其初始粘附于牙叶斑，这是一种牙周致病细菌和其他斑块形成细菌。