虚血ストレスによる臓器障害の時空間的組織修復機構の解明

阐明缺血应激器官损伤的时空组织修复机制

• 批准号: 21H04836
• 负责人: 渋谷 彰
• 金额: $ 27.04万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-05 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H04836/
• 关键词: エフェロサイトーシス; 遺伝子発現変; DAMPs; CD300a; 時空間的ダイナミクス; 脳梗塞; 心筋梗塞; 腎虚血; 肝臓虚血; フォスファチジルセリン; ダメージ関連分子パターン; 炎症; 自然免疫; 抑制性免疫受容体; アレルギー; 肝虚血

虚血によって生じる死細胞は, DAMPsを放出することによって局所ならびにその周囲の無菌性炎症を惹起する。この炎症がさらなる細胞死を誘導し，時間経過につれて広範な組織障害が成立する。一方, 死細胞の除去は, この悪循環を断ち切り, 組織修復の一つの制御機構となりうる。申請者らは, 骨髄球系細胞の活性化を負に制御する免疫受容体であるCD300aを同定し, これが死細胞の細胞膜上に露出するフォスファチジルセリンの受容体であることを明らかにし、さらに CD300aがエフェロサイトーシスを抑制することを見出した。本研究では,脳、心臓、腎臓、肝臓の虚血再還流後の組織障害の時空間的な病理とその分子機構を明らかにし、エフェロサイトーシスを介したこれらの疾患の制御法開発のための基盤的研究を行う。令和４年度においては、臓器虚血後のエフェロサイトーシスは、炎症性単球か、組織在住マクロファージが関与しているかを明らかにすることを試みた。申請者らが確立したGFPマウスを全身照射後, TdTomato Lyz2-CreマウスあるいはCd300fl/fl TdTomato Lyz2-Creマウスの骨髄を移植したキメラマウスを作成し、脳、心臓、腎臓虚血を誘導し, 虚血局所のTdTomato+　単球、好中球、およびマクロファージのエフェロサイトーシスへの関与をフローサイトメトリーまたは免疫組織染色で解析した。その結果、脳においては炎症性単球、腎臓、心臓においては組織在住性マクロファージによるエフェロサイトーシスの亢進が確認され、これによるDAMPsの減少、ならびに組織障害の軽減が認められた。これらの結果から、臓器特性の違いが明らかになった。

缺血引起的死亡细胞通过释放 DAMP 来诱导局部区域内和周围的无菌炎症。这种炎症会导致进一步的细胞死亡，并且随着时间的推移会出现广泛的组织损伤。另一方面，去除死亡细胞可以打破这种恶性循环，并作为组织修复的控制机制。申请人鉴定了CD300a，一种负调节骨髓细胞活化的免疫受体，并揭示其是暴露在死细胞细胞膜上的磷脂酰丝氨酸的受体。此外，我们发现CD300a抑制胞吞作用。在本研究中，我们将阐明脑、心脏、肾脏和肝脏缺血再灌注后组织损伤的时空病理学和分子机制，并旨在开发通过胞吞作用控制这些疾病的方法进行基础研究。 2020 年，我们试图阐明炎症单核细胞或组织驻留巨噬细胞是否参与器官缺血后的胞吐作用。申请人建立的GFP小鼠经过全身照射后，通过移植TdTomato Lyz2-Cre小鼠或Cd300fl/fl TdTomato Lyz2-Cre小鼠的骨髓来产生嵌合小鼠，并诱导脑、心脏和肾脏缺血，产生嵌合小鼠。使用流式细胞术或免疫组织学染色分析局部 TdTomato+ 单核细胞、中性粒细胞和巨噬细胞在胞吞作用中的参与情况。结果，观察到大脑中的炎症单核细胞以及肾脏和心脏中的组织驻留巨噬细胞的胞吞作用增强，从而导致 DAMP 减少和组织损伤减少。这些结果揭示了器官特征的差异。

项目成果

DNAM-1 promotes inflammation-driven tumor development via enhancing IFN-γ production

DNAM-1 通过增强 IFN-γ 的产生促进炎症驱动的肿瘤发展

• DOI: 10.1093/intimm/dxab099
• 发表时间: 2021
• 期刊: Int Immunol
• 影响因子: 4.4
• 作者: Nakamura-Shinya Y;Iguchi-Manaka A;Murata R;Sato K;Van Vo A;Kanemaru K;Shibuya A;Shibuya K.
• 通讯作者: Shibuya K.

Tumor-derived extracellular vesicles regulate tumor-infiltrating regulatory T cells via the inhibitory immunoreceptor CD300a

• DOI: 10.1101/2020.11.10.376715
• 发表时间: 2020-11
• 期刊: eLife
• 影响因子: 7.7
• 作者: Y. Nakazawa;Kazumasa Kanemaru;C. Nakahashi-Oda;A. Shibuya

An inhibitory immunoreceptor, Allergin-1, suppresses FITC-induced type 2 contact hypersensitivity

抑制性免疫受体 Allergin-1 可抑制 FITC 诱导的 2 型接触超敏反应

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2021.09.048
• 发表时间: 2021
• 期刊: BBRC(Biochem Biophys Res Commun)
• 作者: Almeida M;Shibagaki S;Tahara-Hanaoka S;Shibayama S;Shibuya A
• 通讯作者: Shibuya A

Type 1 innate lymphoid cells: Soldiers at the front line of immunity.

• DOI: 10.1016/j.bj.2020.10.001
• 发表时间: 2021-04
• 期刊: Biomedical journal
• 影响因子: 5.5
• 作者: Nabekura T;Shibuya A
• 通讯作者: Shibuya A

CD300a blockade enhances efferocytosis by infiltrating myeloid cells and ameliorates neuronal deficit after ischemic stroke

• DOI: 10.1126/sciimmunol.abe7915
• 发表时间: 2021-10-01
• 期刊: SCIENCE IMMUNOLOGY
• 影响因子: 24.8
• 作者: Nakahashi-Oda, Chigusa;Fujiyama, Satoshi;Shibuya, Akira
• 通讯作者: Shibuya, Akira