Cryo EM/ET Core
冷冻 EM/ET 核心
基本信息
- 批准号:10506949
- 负责人:
- 金额:$ 33.88万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:2022
- 资助国家:美国
- 起止时间:2022-07-01 至 2027-04-30
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:AreaAttentionCapsidCellsClassificationComplementComplexCryo-electron tomographyCryoelectron MicroscopyElectron MicroscopyEnvironmentFluorescence MicroscopyHIVHIV-1ImageIn SituIndividualInfectionIntegration Host FactorsIonsLabelMacromolecular ComplexesMethodsMicroscopyNuclear ImportNuclear PoreNuclear Pore ComplexPlayProcessProteinsResolutionSamplingScanning Electron MicroscopySoftware ToolsStructureTechniquesTechnologyViralVirionWorkX-Ray Crystallographydensityexperienceflexibilityglycoprotein 41inhibitorlight microscopynanometer resolutionnew technologynuclear pore complex protein 96particleprotein complexsingle moleculesmall molecule inhibitorsoftware developmenttrafficking
项目摘要
Cryo-EM/ET Core
Cryo-EM and cryo-ET are powerful techniques for high-resolution structural studies of proteins and protein
complexes, complementing X-ray crystallography and NMR methods. Cryo-ET with subtomogram averaging and
classification, in particular, has recently gained abundant attention as a prime method for characterization of
macromolecular complexes that are intrinsically flexible and often challenging to purify for structure determination
by single particle cryo-EM. Moreover, in situ cryo-ET can inform on structures of complexes within their native
cellular environment, with near atomic resolution. The Cryo-EM/ET Core will play a key role in developing and
applying these cutting-edge methods for structural analysis of heterogeneous HIV-1 viral components and their
complexes with host cell factors and small molecule inhibitors. The Core will support PCHPI projects by providing
structural information on assembly and maturation intermediates as well as capsid-host interactions during
nuclear import and integration. Furthermore, the Core will offer new capabilities of cryo-EM and cryo-ET imaging
of infectious samples in a biosafety level 3 (BSL-3) environment and develop new technologies and workflows
for single-molecule correlation between cryo-ET and super-resolution fluorescence microscopy. These
approaches will yield transformative structural and mechanistic information into the key steps of HIV-1
replication.
冷冻电镜/电子断层扫描核心
Cryo-EM 和 Cryo-ET 是用于蛋白质和蛋白质高分辨率结构研究的强大技术
络合物,补充 X 射线晶体学和 NMR 方法。 Cryo-ET 具有次断层扫描平均和
特别是分类,作为表征特征的主要方法,最近受到了广泛的关注。
大分子复合物本质上是灵活的,并且通常难以纯化以进行结构测定
通过单粒子冷冻电镜。此外,原位冷冻电子断层扫描可以了解其天然复合物的结构
细胞环境,具有接近原子的分辨率。 Cryo-EM/ET 核心将在开发和
应用这些尖端方法对异质 HIV-1 病毒成分及其结构进行分析
与宿主细胞因子和小分子抑制剂的复合物。核心将通过提供支持 PCHPI 项目
有关组装和成熟中间体以及衣壳-宿主相互作用的结构信息
核进口和一体化。此外,该核心还将提供冷冻电镜和冷冻电子发射成像的新功能
在生物安全 3 级 (BSL-3) 环境中处理感染性样本并开发新技术和工作流程
用于冷冻电子断层扫描和超分辨率荧光显微镜之间的单分子关联。这些
这些方法将为 HIV-1 的关键步骤提供变革性的结构和机制信息
复制。
项目成果
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