ソラマメラジカル消去タンパク成分の細胞エイジングに関する研究

Sorama自由基清除蛋白成分对细胞衰老的研究

基本信息

批准号：
08878008
负责人：
岡田悦政
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Chukyo Junior College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ラジカル消去タンパク成分の精製ソラマメラジカル消去活性タンパク成分は、スーパーオキシド、H_2O_2へのラジカル消去活性は見られたが、DPPHラジカルへの消去活性は見られなかった。また、Sephadex G-75ゲロろ過クトマトグラフィー法、SDS ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分子量は、14000であった。2.培養細胞への影響(1)培養細胞へのタンパク成分至適濃度-ソラマメタンパク成分はヒト線維芽細胞を1X10^5個播いて10日間後の細胞数を測定したところコントロールに比べて2.5μg/mlで30%ほど、5.0μg/mlで20%ほど細胞数を増加させることができた。2.5μg/mlが培養細胞への細胞増殖の至適濃度と考えられた。(2)短期培養下における細胞増殖への影響-タンパク成分2.5μg/mlを培養細胞に投与しながら4日、9日、17日、28日目までの細胞増殖への影響を確認したところ17日目以降においてコントロールより22%ほど細胞数を増大させていた。(3)老齢細胞における継代細胞寿命への影響-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを培養細胞(PDL40)の老齢細胞へ投与した結果、継代寿命への延長効果は見られなかった。(4)クローン培養-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを加えて24、48、72時間培養後の単一細胞の増殖への影響は見られなかった。3.細胞内抗酸化酵素活性への影響有機酸化剤tBHP100μMを培養細胞に2時間投与することにより細胞内SOD活性は未処理に比べて380%と大きく上昇したが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlをtBHP投与直前に20時間処理し、培地除去後、SOD活性を測定したところ、未処理に比べてそれぞれ30%、50%ほどの上昇に止めた。同様にカタラーゼ活性については、tBHP投与により、未処理に比べての上昇が40%ほどであったが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/ml事前投与群は、100%、125%と大きくカタラーゼ活性を上昇させた。

1。自由基消除蛋白成分的纯化发现宽豆自由基消除蛋白成分的自由基消除活性对超氧化物H_2O_2具有自由基的消除活性，但没有发现对DPPH自由基的擦除活性。此外，通过Sephadex G-75凝胶过滤术法和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子量为14,000。 2。对培养细胞的影响（1）培养细胞的蛋白质成分的最佳浓度 - 在1x10^5后10天后测量直豆蛋白成分的蛋白质成分的数量，将人成纤维细胞铺平10天，并且细胞的数量在5.0μg/mL时以2.5μg/ml的20％增加约30％。 2.5μg/mL被认为是细胞生长到培养细胞中的最佳浓度。（2）对短期培养物中细胞增殖的影响 - 同时对培养细胞的2.5μg/ml蛋白成分施用，在第4、9、17、17和28天证实了对细胞增殖的影响，并且细胞数量在第17次后的控制中增加了约22％。（3）对衰老细胞中通道细胞寿命的影响 - 由于给予蛋白质成分1.25μg/ml和2.5μg/ml的蛋白质成分对培养细胞中老化细胞的影响（PDL40），未观察到对通道寿命的延长作用。（4）克隆培养 - 在增加1.25μg/ml和2.5μg/ml的蛋白质成分24、48或72小时后，对单细胞增殖没有任何影响。 3。对细胞内抗氧化剂酶的活性的影响，当对培养细胞施用100μM有机氧化剂TBHP 2小时，与未经治疗相比，细胞内SOD活性显着增加到380％，但在1.25μg/ml和1.25μg/ml和2.5μg/ml蛋白质成分中，均及时改良了SOD，并在20小时内进行了SOD，SOD均已改进SOD，SOD又是SOD的SOD，SOD又是SOD的SOD，SOD ARDID ARD SOD ARDID SOD ADVERAPT与未经治疗相比，测量的增长量约为30％和50％。同样，对于过氧化氢酶活性，与未经治疗相比，TBHP给药增加了约40％，但是在组预先管理的蛋白质成分中，过氧化氢酶的活性在100％和125％时显着增加。