食成分によってアルツハイマー症は進行するのか:アミロイドβ生成への関与

饮食成分是否会加剧阿尔茨海默病：参与淀粉样蛋白-β的产生

基本信息

批准号：
21650197
负责人：
岡田悦政
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Aichi Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

[目的]アルツハイマー症原因の一つは、神経細胞へのアミロイドβ(Aβ)の蓄積とされる。Aβ蓄積要因は、過剰な糖、動物性食品、飽和脂肪酸等の過剰摂取によるもの等、幾つかの説がある。本研究の目的は、食成分により実際生体内においてAβ(Aβ様物質)は生成されるのかを検討することである。具体的には、【1】生体内における終末糖化反応(AGR)と終末酸化反応(ALR)進行の結果、Aβが生成されるか否かを細胞内で検討する。【2】Aβ生成の進行に伴い、炎症関連物質が分泌され、細胞死を導くことから、炎症マーカーを測定する。【3】AGR、ALR、炎症反応によって生成された細胞内活性酸素種(ROS)は、細胞死へ誘導することから、ROS量を測定する。[方法]【1】(1)食成分調製:サンプルは、グルコース、リボース、ペプチド、BSA,LAB,OAB,脂肪酸の組み合わせ結果から、AGR反応進行が顕著であったものを再作成。滅菌濾過し20日間37℃でincubationした。(2)マウス神経細胞培養:細胞調製後、プレートにまき、(1)mixtureを投与し37℃5%CO_2条件下で培養した。(3)Aβ測定は、Mathew Lらの方法に従い、ELISA法にて測定。【2】1-(2)を検体として炎症マーカーのTNF-αを測定した。培養細胞上清を用い、TNF-αELISA kitにより測定。【3】Mixture投与培養した細胞内ROS産生量は、H2DCF-DAを加えWang and Josephらの方法に従い測定。[結果]Aβと共にincubationしたサンプルは、Aβ単独よりAβは減少していたが、ペプチドと脂質の組み合わせのうち幾つかは、Glycation値と同様にAβ産生が高い組み合わせが推察された。TNF-α産生はほとんど観察されなかったが、ROS産生は上記と同様に観察され、その機構を検討中である。

[目的]阿尔茨海默氏病的原因之一是神经元中淀粉样β（Aβ）的积累。关于Aβ的积累，有几种理论，例如过量的糖，动物食品，饱和脂肪酸等。本研究的目的是研究饮食成分在体内是否实际产生Aβ（Aβ样物质）。具体而言，[1]我们细胞内是否由于体内末端糖化反应（AGR）和末端氧化反应（ALR）的进展而在细胞内研究了Aβ。 [2]随着Aβ产生的发展，与炎症相关的物质分泌，导致细胞死亡，并测量炎症标记。 [3]由AGR，ALR和炎症反应产生的细胞内活性氧（ROS）诱导细胞死亡，因此测量了ROS量。 [方法] [1]（1）饮食成分的制备：样品是根据葡萄糖，核糖，肽，BSA，LAB，OAB和脂肪酸的组合结果重新创建的，而AGR反应进行了显着。经灭菌并在37°C中孵育20天。（2）小鼠神经元培养：在细胞制备后，将细胞倒在板上，（1）在37°C下混合和培养5％CO_2条件。（3）根据Mathew L等人的方法，使用ELISA方法测量Aβ测量。 [2]使用1-（2）测量炎症标记TNF-α。使用培养的细胞上清液使用TNF-αElisa试剂盒进行测量。 [3]根据Wang和Joseph等人的方法测量混合物给药后产生的细胞内ROS量，并添加H2DCF-DA。 [结果]尽管在单独与Aβ孵育的样品中降低了Aβ，但可以推断出某些肽和脂质的组合具有与糖基化值相似的高Aβ产生。尽管观察到很少的TNF-α产生，但观察到与上述相同的方式观察到ROS的产生，并且正在研究其机制。